产品名称:Vena8 Endothelial+ 生物芯片:用于细胞原代内皮细胞研究和模拟生理流动
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世联博研(北京)科技有限公司的陈工整理了本文章。

Vena8 Endothelial+ 生物芯片:用于细胞原代内皮细胞研究和模拟生理流动

Getting started with Cellix's Vena8 Endothelial+ biochip

Vena8 Endothelial+ Biochip: for cell-primary endothelial cell studies and mimicking physiological flow

介绍

Vena8 Endothelial+ 生物芯片包含 8 个平行封闭的微毛细血管,用于培养原代内皮细胞和基于连续流动细胞的测定。培养原代内皮细胞,然后使用 Cellix 的微流体泵注射细胞悬浮液,该泵支持一系列剪切应力/剪切流速,用于基于动态流动的测定。Vena8 Endothelial+ 生物芯片以 10 片为一包提供,每包可进行 80 次实验。

Vena8 内皮+ 特点

  • 20x、40x、60x、100x短工作距离放大显微镜;60x、100x 油浸显微镜。
  • 更宽的通道,方便细胞接种。
  • 3小时内获得单层原代内皮细胞。
  • 与明场/相衬/荧光/共焦显微镜兼容。
  • 适合培养多种原代内皮细胞。
  • 适用于血和血细胞分析(例如白细胞、血小板)
  • 生物芯片塑料具有光学透明性,可以进行详细的显微镜研究。
  • 易于获得和控制 0.05–200 dyne/cm2 剪切应力/剪切流速
  • 由 Mirus Evo 纳米泵、ExiGo、UniGo 和 4U 微流体泵提供。
  • 剪切应力/剪切流速可以预先设定为在一个过程中逐渐增加。
  • 化验。
  • 流动条件下的实时成像。

应用领域

  • 用于剪切流实验的内皮细胞单层细胞培养。
  • 对内皮细胞单层进行细胞-细胞粘附剪切流测定,用于以下研究:
  1. 心血管/动脉粥样硬化: 原代单核细胞粘附于冠状动脉内皮细胞。
  2. 炎症: THP-1 单核细胞在流动下粘附到 HUVEC。
  3. 哮喘/慢性阻塞性肺病:嗜酸性粒细胞对人肺微血管内皮细胞(HMVEC-L)的粘附研究。
  4. 肿瘤学 - 乳腺癌: MDA 细胞粘附在 TNF-α 上,在剪切流下刺激 HUVEC。

性能和技术规格

*考虑粘度为 4.5 cP 的人类血。

**针对尺寸为:400 μm(宽)x 100 μm(深)x 28 mm(长)的微毛细管中蒸馏水的流动而给出。

Vena8 Endothelial+ 生物芯片,方案 #1:Vena8 Endothelial+ 生物芯片中的涂层和细胞接种

步骤1

使用标准黄色吸头移液器将大约 12 μL 蛋白质(例如纤连蛋白,100 μg/mL)分配到每个微通道中,从而对 Cellix Vena8 Endothelial+ 生物芯片进行涂层。注意入口和出口处的过量液体。

2步

然后将 Vena8 Endothelial+ 生物芯片放入加湿盒中,在 CO2 培养箱中保持开放 1-1.5 小时。或者,可以将生物芯片置于 4°C 下过夜涂覆。

步骤3

孵育期结束后,将 5 μL 1.5 x 106 /100 μL (? 15 x 106/mL) 内皮细胞轻轻添加到每个通道中。

注意:指定的浓度适用于原代 HUVEC。

将生物芯片置于 CO2 培养箱中 15-20 分钟,以便细胞粘附。在显微镜下观察生物芯片,并用 50 μL 介质填充所有储液器。将生物芯片在 CO2 培养箱中放置 1.5-2 小时。

Vena8 Endothelial+ 生物芯片方案 #2:使用 Vena8 Endothelial+ 生物芯片在剪切流下执行细胞滚动、粘附和迁移测定(手动版本 - 不适用于 VenaFlux 平台)

步骤1

将悬浮细胞(例如T细胞、单核细胞、血小板)以适当的浓度(通常2-5 x 106/mL)重新悬浮在Eppendorf管中的培养基中。

2步

使用 Cellix Mirus Evo 纳米泵或 ExiGo 泵,从泵输出电缆分配 10 μL 介质。随后,将输出电缆插入 Vena8 Endothelial+ 生物芯片上的指定通道。

步骤3

然后使用 Cellix Mirus Evo 纳米泵或 ExiGo 泵,以 40 达因/cm2 的剪切应力通过通道注入 40 μL 介质。这样做是为了清洗细胞碎片的通道。用移液器从 Vena8 Endothelial+ 生物芯片的微孔中吸出废物。

步骤4

将细胞样品放入 Vena8 Endothelial+ 生物芯片上该通道的微孔中。

步骤5

通过在 FlowAssay 软件上指定所需的剪切应力,将细胞引入通道中。流量将自动计算。

步骤6

在每个剪切应力值下,建议沿通道长度采集 3-5 个细胞滚动和粘附视场的图像。

现在您已经了解了我们的功能和优点 Vena8 Endothelial+ 生物芯片以及它们的工作原理。但是,如果您仍有疑问或想了解更多信息,请访问我们的网站,或联系我们。返回搜狐,查看更多

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