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2018-08-24至2018-08-25 上海
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单细胞药敏在肿瘤临床治疗中的应用

来源:宸安生物 医世象


 






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从2006年第一种肿瘤预防疫苗获批到如今细胞免疫疗法和基因疗法如火如荼,肿瘤的临床治疗已经全面进入了诊断和治疗高度衔接融合的精准医学时代。这对病理医生从病理诊断的精准性到病理技术的精准性提出了全新的要求。
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肿瘤是复杂的系统性疾病,具有显著的个体差异和进展差异,这普遍存在于患者间、肿瘤组织内,肿瘤的转移过程也会造成肿瘤转移灶与原发灶之间的异质性。

由于肿瘤这一特性,不同患者对相同治疗方案的响应,以及同一患者对不同治疗方案的响应都存在显著差异。

病理作为临床治疗的重要依据,要为精准治疗提供有力的支持,为临床提供个性化用药依据,动态评估患者对疗法的响应。
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肿瘤细胞药敏试验就是精准诊断的典型应用之一。多家临床单位在积极开发开展这一检测项目,衍生出各种方法学。


药敏试验包括对肿瘤细胞的培养和对药物敏感性的检测,其中培养方法主要分为体外培养和体内培养,包括体外的原代细胞培养、细胞传代培养、CD-DST和体内的PDX小鼠种植模型等方法。


而常用的检测方法则以经典的MTT法等酶活检测法为主。
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然而很多方法学在临床实际应用过程中遇到挑战。


首先细胞需求量很大,不得不进行体外扩增,传代导致体内体外相关性丢失,影响结果准确性。而采用模拟体内环境的CD-DST和PDX法则存在费用较高,处理时间较长,不适宜普遍性检查。
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在定量层面,MTT法等检测方法无法分辨肿瘤细胞和正常组织细胞,使用免疫组化进行鉴定又会失去细胞活性,使得最终检测结果受瘤旁细胞的干扰较大,影响准确性。
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这两大问题使得药敏检测试验在临床应用中面临阻力。但临床确实有进行肿瘤药物个体化评价的需求,尤其是为难治复发患者提供更具有普适性的化疗方案评价。


为了解决上述问题,何妙侠教授建议可以从两个角度着手。


第一,进行单细胞水平检测分析,从而避免细胞传代扩增导致的体内体外相关性丢失。当有能力对单细胞进行检测时,就仅需对样品进行很简短的恢复性培养,完全保留细胞的体内特性。
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第二,通过使用肿瘤活细胞特异性指标,可以对样本中的肿瘤活细胞对药物的响应进行分析,避免间质细胞对药敏结果的干扰。
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最新的活性肿瘤单细胞药敏检测技术,基于4项新技术,使得临床有效性大大提高。


只需对肿瘤细胞进行超短时体外培养,随后就可以添加药物进行基于PET-CT原理的单细胞荧光定量,最后使用自动化的神经网络图像识别算法给出药敏结果。


另外,配合循环肿瘤细胞无损高效富集技术,药敏检测的应用范围可以扩大到血液样本,使得应用前景也更加广阔。

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这项技术在病理科是非常适用的。


病理科会处理大量的肿瘤组织,传统的肿瘤药敏试验就是在病理科完成的。


因此,这种更精准的肿瘤药物敏感性检测可以支持病理科为临床提供更丰富的个性化治疗信息。

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