钙通道成像工作站 |
型号:: 离子通道 |
价格:请致电:010-57128832,18610462672 |
品牌: 美国 产品商标: sutter |
离子成像系统
钙离子是生命活动最重要的离子之一,通过测定细胞内游离钙离子浓度,可以得知肌肉收缩、神经信号传导、细胞间通讯、***反应等生命活动的重要信息。目前世界上胞内钙离子的主流测量方法分为电测量法和光测量法。电测量法利用细胞膜片技术测定钙电流引起的细胞膜电位的变化。光测量法利用能与钙离子特异性结合的荧光探针来测定细胞荧光强度的变化。而更为准确和先进的方法是则是光电联合测量法,这两者相互印证、相互辅助,可以得出离子浓度变化的准确信息。 实验原理 目前最常用的Fura-2是一种钙离子荧光指示剂,可与胞内游离钙离子特异结合,其游离(未结合)形式的Fura-2比与钙结合形式的Fura-2在更长的波长上被激发,即结合形式的Fura-2激发波长为340nm,游离形式的Fura-2激发波长为380nm。因此通过检测两个激发波长上荧光强度的比率,就可以确定结合钙的Fura-2与未结合的Fura-2的比例,进而利用Grynkiewicz公式求出游离钙离子的浓度。Grynkiewicz公式:【Ca2+】i=Kd*β(R-Rmin)*(Rmax-R)。其中,Kd为Fura-2和钙离子结合的平衡解离常数,β是胞内零钙和饱和钙时在380nm的荧光强度比值,R是Ratio比值,Rmin是零钙时Ratio值,Rmax是饱和钙时Ratio值。Fura-2法可用于测定组织快、器官、人工培养的单层贴细胞、血小板等多种细胞胞内游离钙,此检测方法定量,具有快速、灵敏等优点。 系统扩展 利用不同的荧光指示剂对不同离子进行染色以后,再利用专业的荧光光源进行激发。该系统可以扩展到测量K、Na、Mg、Cl等多种离子的浓度变化。 系统主要构成 1、科研级高灵敏制冷CCD:为离子成像系统的最主要部件。他的灵敏度高低、信噪比大小直接影响到实验的结果。 4、分析软件:带有CCD、光源等周边设备软件控制模块,8、16、24、48位图像显示与处理功能模块,2D去卷积、3D重建、多种形态学参数及距离测量模块。同时还具有荧光强度比例成像的数据采集与处理功能。
|