英文名称： Biotin Labeling Kit
Elabscience生物素标记试剂盒提供了生物素标记所需全部试剂，用于含有氨基（NH2-）抗体的标记。生物素已经活化，可直接使用，每个试剂盒足以完成3次标记，每次可标记0.2-2mg。试剂盒中包括6个用于抗体标记脱盐的Filtration tube，不用透析，操作简便，熟练操作90min可完成整个标记过程。
产品特点：
Ø 试剂全面:本试剂盒提供了生物素标记所需全部试剂。
Ø 快速:整个过程仅需90min。
Ø 方便:通过Filtration tube即可脱盐，无需透析或者凝胶过滤。
Ø 使用灵活:既可用于微量标记又可大量标记，每次可标记0.2-2mg。
Ø 理想的标记效果:已经优化确定了最适的标记比例，降低标记不足或由于过度标记而失活的可能性。
产品组成：
| 组分 | 规格 |
| NH2-Reactive Biotin | 0.1mg/支×3 |
| Labeling Buffer | 10mL×1 |
| DMF | 500μL×1 |
| Filtration tube | 0.5mL/管×6 |
标记过程需要仪器：
1. 10ul，50ul，200ul，1000ul可调高精度移液器
2. 恒温箱（37℃）
3. 离心机（离心力可达到12,000×g）
储存条件：
本试剂盒未开封前在2-8℃可稳定保存一年
生物素标记反应原理：
NH2-Reactive Biotin专一地与伯胺反应（N-末端及赖氨酸残基侧链）形成稳定的酰胺键
生物素标记NH2-Reactive Biotin使用量的计算：
每个反应中生物素试剂的使用量取决于待标记蛋白质的量和浓度。通过优化，我们确定了标记2mg/ml的抗体（IgG ，150KD），使用生物素和抗体的分子比为20:1能达到较理想的标记效果。
1、标记2mg/ml的抗体，使用生物素和抗体的分子比为20:1时，应加入生物素量的计算方法：
2、对于10mmol的生物素溶液，应加入反应中该生物素体积的计算方法：
计算示例：
对于0.5ml 2mg/ml的IgG（分子量为150,000）溶液，需加入10mM的生物素溶液13.3ul。
操作过程：
实验前准备：
1.仔细阅读使用说明书。
2.计算待使用NH2-Reactive Biotin的量。
3.提前20min从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温（注：不需要用到的NH2- Reactive Biotin继续放置冰箱中）。
4.溶解NH2-Reactive Biotin：加入30ulDMF至NH2-Reactive Biotin瓶中，静置10min，待其充分溶解，此时生物素的浓度为10mM。
操作步骤：（本操作步骤按照1mg的量进行标记）
1. 取1mg待标记抗体于Filtration tube中，并加入相应体积的 Labeling Buffer至总体积为0.5mL，12,000 x g离心10min。（注：①Filtration tube的最大体积为0.5ml ②待标记抗体浓度低时，可先超滤离心一次）
2. 加入13.3ul NH2-Reactive Biotin 和适量Labeling Buffer至上述Filtration tube中，使抗体的终浓度为2mg/ml，并轻轻吹打混匀。放入37℃恒温箱中避光温育30min。
3. 12,000 x g离心10min。
4. 加入适量Labeling Buffer至上述Filtration tube中，使终体积为0.5ml，并轻轻吹打混匀，12,000 x g离心10min。并重复操作一次。
5. 加0.2ml Labeling Buffer至Filtration tube中，轻轻吹打。将滤芯倒转放置于另一个离心管中，6,000 x g离心10min。
6. 收集离心管中的溶液，即为生物素标记的抗体。
注意事项：
1. 本试剂盒也可标记其它含有氨基（NH2-）的抗原、HRP、多肽，具体标记比例根据待标记物中氨基的数量确定。
2. DMF要密封干燥保存，使用完立即用封口膜封紧。
3. 操作步骤5中，可用Labeling Buffer作为回收标记抗体的缓冲液，也可使用其它任何缓冲液或保护剂。
4. 本试剂盒未开封前的有效期为一年，请在有效期内使用。
5. 本试剂盒提供的为10KD的Filtration tube，标记抗原或多肽请注意分子量的大小。
6. 在步骤2中，标记其它抗体时，我们应先控制抗体的终浓度为2mg/mL，然后再根据抗体的量计算应加入NH2 - Reactive Biotin的体积。