兔免疫组化(IHC)检测试剂盒 英文名称: Immunohischemistry Kit for Rabbit Primary Antibody | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
型号:null 产品货号: 36312ES64 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
价格:请致电:010-57128832,18610462672 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
品牌: yeasen | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
产品信息
产品描述 翊圣IHC Kit for Rabbit Primary Antibody可用于检测以兔单克隆或多克隆抗体为一抗的免疫组化实验,检测原理基于高特异性高亲和力的链霉亲和素-生物素结合:已固定或培养细胞的抗原与一抗形成抗原抗体复合物,生物素化二抗特异性结合上述复合物,经辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素特异性识别生物素(即抗原所在位置),最后经辣根过氧化物酶底物显色即可检测相应抗原。 本品可适用于多种类型样本,如石蜡包埋切片、冰冻切片、培养细胞涂片及血液标本等。 产品组分
运输和保存方法 冰袋运输。4℃保存,有效期1年。勿冰冻! 注意事项 1)检测样本时需同时做阴性对照和阳性对照 2)DAB是一潜在致癌物,使用时请注意自我防护。 3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
准备试剂 1)二甲***、乙醇、甲醇 2)去离子水 3)30%过氧化氢溶液(Cat# 36216) 4)1×PBS, PH7.4(Cat#60145) 5)苏木素染色液(Cat#60502)
6)封片剂(Cat#36313)
使用方法 1 样品准备 染色前用PBS浸泡组织或细胞涂片10min。石蜡切片于室温下用二甲***常规脱蜡、入水、抗原修复。 【注】:从此步骤起,严禁标本或组织切片干燥。 2 染色(以石蜡切片为例)
1)将处理好的石蜡切片放入3% H2O2-甲醇溶液中浸泡10min,以消除内源性过氧化氢酶的作用。 2)清洗:PBS清洗3次,2 min/次。 3)封闭:加一滴封闭液于组织切片上(需完全覆盖待检组织)孵育10min。 4)倒掉或吸干液体(不要冲洗)。 5)一抗孵育:每张切片加2滴(100μl)或适量一抗(需完全覆盖待检组织),湿盒内孵育30-60min。 6)清洗:PBS清洗3次,2 min/次。 7)二抗孵育:每张切片加一滴生物素标记抗兔二抗(需完全覆盖待检组织),孵育10min。 8)清洗:PBS清洗3次,2 min/次。 9)酶孵育:每张切片加一滴HRP标记链霉亲和素(需完全覆盖待检组织),孵育10分钟。 10)清洗:PBS清洗3次,2 min/次。 11)制备DAB显色液。 按照【20×DAB浓缩液:20×H2O2浓缩液:20×DAB底物缓冲液:水=1:1:1:20】的比例进行配制显色液,以1张切片为例,分别吸取上述3种溶液各2.5µl溶于50µl去离子水中,充分混匀即可。 【注】:① DAB显色液需现配现用,避光放置,且在30min内使用。 ② 可根据需要一次染多张切片,各种试剂量按照上述比例放大即可。 12)显色:向切片上滴加一滴上述DAB显色液,室温显色2-5min(此步可在显微镜下控制显色程度)。 13)自来水充分冲洗。 14)用合适复染剂复染,盐酸酒精分化。 15)继续后续脱水、透明、封片、镜检。 2 结果判定 阳性结果处显处染棕黄或棕褐色。 相关产品
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