Near-IR CF 染料

荧光强度最高、最稳定的长波长染料。特别适合于体内成像以及其他需要近红外检测的应用

近红外 CF 染料是由 Biotium公司科研人员开发的一组吸收和发射波长在 650 到8 0 0 n m 之间的荧光染料。近红外 C F 染料是为蛋白标记开发的，荧光强度远比其他相似波长的商业化染料更高， 同时也更稳定。近红外染料和传统的可见光染料相比有显著的优势。由于细胞和组织的自发荧光在近红外波段最小，因此在检测复杂生物系统时，近红外染料能提供更高的特异性和灵敏度。同时，由于光波在近红外区段的组织透过性更好，因此近红外染料尤其适合体内荧光成像这一近几年迅速发展的新兴领域。另外，近红外染料也是细胞内/全细胞免疫印记和传统基于膜介质免疫印记的理想染料。

近红外 CF 染料作为新一代的长波长染料，代表了这一领域的重大突破。现有商业化的近红外染料，由于染料的过分聚集以及稳定性差，因而受制于荧光亮度有限的问题。得益于 Biotium 公司科研人员采用的创新型分子工程学技术，近红外 CF 染料克服了上述问题，从而比其他竞争产品具备了关键性的优势：近红外 CF染料荧光强度极高并且非常稳定。例如，CF750 亮度高至可以在 633nm 处激发（即在吸收峰值的肩部激发），而 此时在 770 nm 左右的荧光发射强度仍然高于基于APC的串联染料。因此，近红外 CF 染料特别适合于流式细胞仪的各种应用，从而可以避免串联染料稳定性等带来的问题。

图 1: Cy7，AlexaFluor750 和 CF750染料稳定性。上图所示为各自染料在阳光照射30分钟前（黑线）和照射后（灰线）的吸收光谱。

另外，近红外 C F 染料拥有专利的结构特性，这使近红外 C F染料和其他竞争产品相比免疫源性更小。因此，在标记同一个蛋白时，可以连接更多的近红外 CF 染料以获得最大的荧光亮度。同时，这样标记获得的蛋白复合物在体内的半衰期也更长。最后一点，由于近红外 CF 染料优异的溶解性和大于9 5 % 的活化程度，它的标记效率也远远高于其他近红外染料。

图 2: 用同型对照或鼠抗人CD3抗体作为一抗，用APC-AlexaFluor750(Invitrogen) 或CF750标记的山羊抗鼠二抗染色Jurkat细胞。抗体用量如图上所列。用BD LSR II 流式细胞仪的633 nm激光器和780/60n m P M T 检测器分析荧光。柱状图代表了相对荧光值的几何均数。

图 3: 柱状图代表了图2中相对荧光值几何均数的信噪比。

 

图 4: 分别用CF750，AlexaFluor750或Cy7标记山羊抗鼠IgG二抗。用Hita c h i F - 4 5 0 0荧光光度计测定荧光强度。上图所示为均一化的荧光值。

图 5: 用胞内CD3抗体或者同型对照孵育Jurkat 细胞并分别用1ug标记了Cy5.5，AlexaFluor680，CF680 或 DyLight680的山羊抗鼠 IgG 荧光二抗染色。用BD FACS Calibur流式细胞仪的FL4通道检测荧光。柱状图代表了C D 3阳性荧光值和标记程度（D O L）相似的同型对照相比的信噪比。

图 6: 在尾静脉注射CF750标记的Avastin 24小时和96小时后，使用活体成像系统（Caliper LS）分别成像小鼠体内的肿瘤。图片来自于Caliper Life Sciences公司。

产品特点

Ø  亮度

CF染料在亮度上达到或者超过Alexa Fluor和CyTM等其它商业化的染料

Ø  光稳定性

CF染料的光稳定性在同类染料中屈指可数

Ø  特异性和体内稳定性

CF标记的抗体具有高度的特异性，同时还能延长抗体在体内成像时的半衰期。

Ø  对pH值不敏感

CF染料在很宽的pH值范围内都能维持高亮度的荧光。

Ø  溶解性

CF染料在水以及各种有机溶剂中有高度的溶解性。

Ø  兼容性

CF染料的光谱特性和其他商业化的染料相似，兼容常见的激发光源和现有的各种滤片。

Ø  多种颜色可供选择

CF系列染料包括了从紫外到近红外的多种颜色的染料可供选择。

产品应用

Ø  体内成像

CF活化染料和试剂盒可用于小型动物的成像。

Ø  免疫印记

用高度交叉吸收后的抗体进行免疫印记可使交叉反应和背景降至最低。

Ø  蛋白标记

CF活化染料和试剂盒用于定制标记复合物。

Ø  流式细胞仪

优异的非串联标记复合物用于细胞染色。

Ø  显微成像

高亮度，光稳定的抗体和活化染料可用于多重标记。