elisa代测绵羊MHB/高铁血红蛋白elisa试剂盒用于检测血清，血浆及相关液体样本中的含量，试剂盒采用进口材料生产，灵敏度高，专业的权威的酶免专家，提供技术服务。可免费代测，数据分析。试剂盒受到各高校，三甲医院，科研机构等一致好评，欢迎来电咨询！电话：400-638-1113  QQ：2507862940

ELISA原理

　　ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚***乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法(图a)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图b)以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。

elisa代测绵羊MHB/高铁血红蛋白elisa试剂盒样品采集：

　　收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月。-70度可保存6个月。部分***类标本需添加抑肽酶。

Elisa实验前的准备

1仔细阅读说明书

2确定试剂盒在有效期内

3按说明书确定所有试剂齐全(数量、体积)

4标本制备要规范，每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备(贮存)，尽量分装做备份。短期内无法实验者，注意低温保存

5准备好所有实验额外所需物品，如试管、吸头、移液器、离心机等

6根据检测标本数量确定所需试剂的量

7按说明书将所用试剂平衡至室温，配制所需试剂

elisa代测绵羊MHB/高铁血红蛋白elisa试剂盒过程中可能出现的问题和解决方法

显色淡，灵敏度偏低

1、试剂盒在运输途中时间太长，温度太高

尽量缩短运输时间，夏季应放冰块降温

2、试剂盒未充分平衡

试剂盒从2～8℃冰箱取出后打开盒盖，于室温平衡至少20分钟，确保所有试剂已平衡至室温（约25℃）。

3、培养箱温度不足37℃

注意培养箱温度，放入反应板后尽量减少开启次数以免影响温度恒定，非隔水式培养箱尤其应注意

4、保温时间不足

校正定时钟准确定时

5、洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增加

按说明书要求保留洗涤时间，准确记住洗涤次数

6、移液器吸液量不足，吸嘴内壁挂水太多或内壁不清洁

校正移液器，吸嘴要配套，装吸嘴时要紧密，吸嘴内壁要清洁，最好一次性使用

7、蒸馏水水质有问题

使用新鲜合格的蒸馏水

8、底物作用时间不足

准确定时

背景深，全部呈有色

1、洗涤不充分，洗后未拍干，样品中其它成分残留或酶标记物残留

浓缩洗液准确配制；10倍浓缩洗涤液如有结晶则应让结晶于室温全部溶解后再量取稀释；充分洗涤，彻底拍干。加样或加酶拍板的滤纸应弃去不用，不要反复使用，否则易造成污染

2、样品污染

样品应新鲜采集，或低温保存，防止污染

3、培养箱温度超过37℃或反应时间过长

调整培养箱温度，准确定时

4、吸嘴重复使用，未洗净或消毒不彻底

吸嘴尽可能一次性使用

5、蒸馏水被污染

使用新鲜蒸馏水

6、酶等试剂混用

不同批号试剂勿混用

7、一次实验的标本量过多，加样时间太长，导致实际反应时间延长

合理安排实验，避免几块酶标板同时加样

重复性不佳

1、样品数量多少不一，加样时间有长有短

重复某一样品时，加样时间尽可能与第一次接近

2、保温时间不一致，洗涤条件不一致，操作人员不一致

重复测定标本，操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致，以排除这些因素造成的不一致的可能性

3、加样量不一致

样品稀释前应充分混匀，尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴

出现白板,阳性对照不显色

显色液变质

更换新的显色液

洗涤液配制有误

请按说明书所示稀释倍数配制

未加酶结合物而认为已加入

注意不要漏加

 终止液误作洗涤液稀释或当底物液使用 

每次加液前均应看清标签

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