普鲁士蓝染色试剂盒（中性红法）产品简介：含铁血黄素（Hemosiderin）是一种血红蛋白源性色素，为金黄色或棕黄色颗粒，因其含铁、金黄色，故称为含铁血黄素。当红细胞被巨噬细胞吞噬后，在溶酶体酶的作用下，血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。Perls 普鲁士蓝反应（Prussian blue reaction）又称为含铁血黄素染色，即经过亚铁*化钾和稀酸处理后可以产生蓝色，常见于吞噬细胞内会间质内，主要显示三价铁盐。Perls 普鲁士蓝是非常经典的组织化学反应，是显示组织内三价铁的一种敏感、传统优良的方法，其染色原理为：亚铁*化钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来，三价铁与亚铁*化钾反应，生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁*化物普鲁士蓝，所以该反应被称为普鲁士蓝反应。三价铁的亚铁*化物是一种很稳定的化合物，在反应后可用红色染色剂进行复染，如核固红、伊红、中性红等。Perls stain 常用于显示局部组织内各种出血性病变，常见于吞噬细胞内。在判断含铁血黄素沉积时，用Perls 反应可以得到证实，该染色方法可以很好的区分含铁血黄素和其他色素。该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广、可以进行复染。产品组成：规格 2×50ml 2×100ml Storage试剂（A）： A1：Perls stain A 25ml 50ml RTPerls stain A2：Perls stain B 25ml 50ml RT临用前，取A1、A2 等量混合，即为Perls stain，不宜提前配制。试剂(B): 中性红染色液 50ml 50ml 100ml RT 避光使用说明书 1 份⾃备材料：1、10%的中性福尔马林固定液2、系列乙醇3、蒸馏水4、4%的多聚甲醛操作步骤（仅供参考）：（一）石蜡切片染色1、 组织固定于10%中性福尔马林，常规脱水包埋。2、切片厚度4um，常规脱蜡至水。3、蒸馏水洗1min.。4、切片入Perls stain（见注意事项4），浸染15～30min5、蒸馏水充分冲洗2～5min 。6、入中性红染色液，淡染细胞核15～30s。7、自来水冲洗1～5s。8、常规脱水透明，中性树胶封固。（二）冰冻切片染色1、 无需脱蜡，直接迅速用蒸馏水冲洗2～3min。2、 染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤，时间可以相应缩短。（三）细胞染色1、4%多聚甲醛固定10～20min。2、自来水冲洗2 次，每次2min。3、蒸馏水冲洗2 次，每次2min。4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤，时间可以相应缩短。染⾊结果：含铁血黄素或三价铁 蓝色细胞核、其他组织 红色阴性对照（可选）取相同连续切片脱蜡至水。置于5%的草酸中，孵育2～6h 后，经Perls stain，需要步骤同上。结果为阴性。注意事项：1、 切片脱蜡应尽量干净。2、 组织固定常采用10%的中性福尔马林，经普通福尔马林长期固定后，组织会有损伤。避免使用酸性固定剂，铬酸盐处理也会妨碍铁的保存。3、 整个操作过程中容器要干净，避免使用金属铁制品，洗切片和容器时以蒸馏水为宜，因普通水内含铁质。4、 Perls stain 染色时，应根据样品情况调整着色时间。5、 所有切片都应使用同一个阳性对照切片，选择适合的对照非常重要。尸检肺组织是一个很好的对照，包含相当数量的铁阳性巨噬细胞(心衰细胞)。6、系列乙醇应经常更换新液。7、冰冻切片和细胞的染色，应根据具体情况摸索实验条件。8、为了您的健康和安全，请穿实验服并戴一次性手套操作。有效期：12个月SolarbioBeijing Solarbio Science & Technology Co., LtdTel: 010-56371210Fax: 010-56371281/82Http://www.solarbio.cn