超低分子量蛋白质Marker（3.3kD-20. 1kD)说明书货号： PR1300规格： 15T (150 μ1)保存： -20℃保存，有效期为一年。产品简介:本产品包含3种多肽和2种低分子量蛋白质组成，分子量范围为3. 3kD-20. 1kD。 可以用来判断SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。本品为蛋白质和多肽混合物的冻干粉，每种蛋白含量约为15-22.5ug，配有一支1×上样缓冲液。使⽤说明:1. 开封后，溶于150 μ1 1×上样缓冲液，于95℃水浴5分钟，可根据需要进行小量分装，每管10 μl，-20℃贮存，每次取一管使用，避免反复冻融。2. 使用前取分装后的小管室温融化后，95℃预热5分钟即可上样电泳， 用考马斯亮蓝G-250染色后可见5条蛋白带(见下示意图) 。凝胶的配置⽅法:分离胶 夹层胶 浓缩胶20%/4.5ml 16.5%/4.5ml 15.5%/4.5ml 10%/2ml 4%/2ml49.5%T 3%C / / / 0.407ml 0.160ml49.5%T 6%C 1.82ml 1.50ml 1.395ml / /凝胶缓冲液 1.50ml 1.50ml 1.50ml 0.667ml 0.496ml甘油 0.48ml 0.48ml 0.48ml / /ddH2O 0.70ml 1.02ml 1.125ml 0.926ml 1.344ml10%APS 40%l 40%l 40%l 20μ| 20μ|TEMED 5%l 5%l 5%l 3%l 3%l凝胶制备及染⾊注意事项:1. 先配制分离胶，聚合后再配制夹层胶，最后配制浓缩胶，3种胶的制胶体积比为4:1.5:1。电泳时，30v跑1-2小时后，待指示前沿到达分离胶上沿时，把电压调至100v，至电泳结束，整个电泳过程大约需要6-8小时。2. 由于多肽所含的氨基酸数目较少，因此如该多肽含有过多的极性氨基酸(碱性或酸性)，则会影响其在SDS-PAGE 图上的条带迁移率，即其表观分子量可能和多肽的氨基酸理论推算分子量有一定距离。3. 由于SDS-PAGE 的图谱上，蛋白质对数分子量和迁移率成正比直线关系的分子量范围为15,000-200,000，因此对于分子量小于10000 的蛋白质或多肽的分子量，只能根据标准分子量进行估计，推断其是否落入预测的分子量范围。4. 由于超低分子量多肽（3000 及3000 以下），极易从凝胶上浸出，因此染色及脱色时间不宜太长，脱色后凝胶也不宜在水中浸泡保存过久，否则条带会消失。5. 电泳之后可将胶置于固定液中固定20分钟，再进行染色，能得到较好的蛋白条带；如时间不允许，也可不进行固定直接染色。如果使用配方7进行染色时效果不好或考虑其毒性，请选择本公司的考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液(货号:P1300)，该产品具有染色快，无毒，灵敏性高等特点，是常规染色液的替代品。相关产品：P1015 4×蛋白上样缓冲液（含DTT）P1016 4×蛋白上样缓冲液（含β-***）A1030 10%过硫酸氨T1070 5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液P1300-500 考马斯亮蓝快速染色附:小分子蛋白质SDS-PAGE电泳试剂配制1. 49.5% T 3 % C (配制夹层胶和浓缩胶)丙烯酰胺 48g甲叉双丙烯酰胺 1.5g用ddH20溶解后定容至100ml2. 49. 5 % T 6 % C (配制分离胶)丙烯酰胺 46. 5g甲叉双丙烯酰胺 3. 0g用ddH20溶解后定容至100ml3. 凝胶缓冲液Tris碱 182gddH20 300ml用HCl调节pH值至8.45用ddH20定容至 500ml再加入SDS 1.5g4 . 10×阳极缓冲液(下槽缓冲液〕Tris碱 121. 1 gddH20 400ml用HCl调pH值至8.9用ddH20定容至 500ml5. 阴极缓冲液(上槽缓冲液)Tris碱 12 .11gTricine 17.92gSDS 1g用ddH20定容至1000ml此溶液不用调节pH值6. 固定液0.5% 戊二醛30% 乙醇用ddH20定容至100ml7. 染色液50% 甲醇10% 乙酸0.2% 考马斯亮蓝G-250用ddH20定容至500ml

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