BCA蛋白定量试剂盒
英文名称: BCA Protein Assay Kit
型号:null    产品货号: PT0001
价格:请致电:010-57128832,18610462672
品牌: 北京

BCA蛋白定量试剂盒

产品简介:

目前世界上最常用的蛋白浓度检测方法是:BCA蛋白定量试剂盒(BCA Protein Assay Kit)Bradford蛋白定量试剂盒(Bradford Protein Assay Kit)BCA 法与传统方法相比,更简单、更稳定、更灵敏度。BCA法测定蛋白浓度兼容性亦很好,不受大部分样本中其他成分的影响,对于5%以内的SDSTriton X-100Tween 20 Tween 80具有很好的兼容性。BCA法测定蛋白浓度易受螯合剂、高浓度的还原剂影响。在BCA法测定蛋白浓度前,应尽量使EDTA浓度≤m10M; DTT浓度≤1mM2-ME0.01%

Leagene BCA Protein Assay Kit501000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系, 其最小检出量为25μg/ml

产品组成:

                     编号

名称

PT0001

250T

PT0001

500T

Storage

试剂(A): BCA试剂A

50ml

100ml

RT 避光

试剂(B): BCA试剂B

1.5ml

3ml

RT 避光

试剂(C): 蛋白标准(BSA)

20mg

20mg

RT

试剂(D): 蛋白标准配制液

1.5ml

1.5ml

RT

使用说明书

1

 

 

 

 

 

 

 自备材料:

1、 酶标仪或分光光度计

2、 96孔板或离心管

3、 恒温箱

 操作步骤(仅供参考)

1、 1ml蛋白标准配制液加入到蛋白标准(BSA)(20mg)中,充分溶解后配制成20mg/ml的蛋白标准溶液,配制后可立即使用,溶解后的蛋白标准溶液应-20℃保存。

2、 取适量20mg/ml蛋白标准,稀释至终浓度为500μg/ml或所需浓度。特别提示:待测蛋白溶解于什么样的稀释液中,蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中。例如待测蛋白溶解于蔗糖中,亦取20mg/ml蛋白标准溶解于蔗糖中。一般也可以用0.9%NaClPBS作为溶解BSA稀释液。稀释后的500μg/ml蛋白标准也应-20℃长期保存。

3、 根据样品数量,按试剂(A):试剂(B)=50:1的比例配制BCA工作液,即取50BCA试剂A1BCA试剂B, 充分混匀,即获得BCA工作液。例如取5ml BCA试剂A0.1ml BCA试剂B,配制成5.1ml BCA工作液。BCA工作液室温24小时内稳定。

4、 将标准品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20μl加到96孔板的标准品孔,加稀释液补足至20μl

5、 加适当体积待测蛋白样本到96孔板的样品孔中。如果标准品稀释液与溶解待测蛋白样本的溶液不同,应在待测蛋白样本孔中加入20μl稀释液;如果标准品稀释液与溶解待测蛋白样本的溶液相同,无需在待测蛋白样本孔中加入20μl稀释液。

6、 各孔加入200μl 配置好的BCA工作液, 37℃放置2030min

7、 测定562nm波长处的吸光值,如无562nm540595nm之间的波长也可。

8、 根据标准曲线计算出样品的蛋白浓度。

 注意事项:

1、         蛋白标准(BSA)粉末溶解于蛋白标准配制液后,即获得蛋白标准原液,该原液中含有防腐剂,不影响后续检测,该蛋白标准原液-20℃长期保存。

2、         待测蛋白溶解于什么样的稀释液中,蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中,否者待测蛋白与蛋白标准中所含非蛋白成分不一致,有可能导致测定不准确。

3、         待测蛋白和蛋白标准加入BCA工作液后,如果发现检测效果不佳,可以室温放置2h60℃放置30min,颜色会随着时间的延长不断加深。显色反应也会随温度升高而加快。如果浓度较低,可以适当延长孵育时间或在较高温度下孵育。

4、         测定标准曲线时发现随着标准品浓度的增加吸光度或颜色没有明显变化,可能的原因是样品中含有严重干扰BCA法测定蛋白浓度的物质。

5、         建议每次测定时都做标准曲线。因为BCA法测定时颜色会随着时间的延长不断加深,并且显色反应的速度和温度有关,所以除非精确控制显色反应的时间和温度,否则如需精确测定宜每次都做标准曲线。

6、         如果没有酶标仪,也可以使用普通的分光光度计测定,但应考虑根据比色皿的最小检测体积。应按比例适当加大BCA工作液的用量使总体积不小于最小检测体积,样品和标准品的用量亦相应按比例放大。使用分光光度计测定蛋白浓度时,每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。

7、         为了加快BCA法测定蛋白浓度的速度可以适当加热,但是切勿过热,否则易失效。

8、         BCA法检测中样本中不应含有EGTA,否则影响检测结果。为了加快BCA法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热,但是切勿过热。室温保存。蛋白标准配制成溶液后-20冻存。

9、         为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

有效期: 6个月有效。蛋白标准配制成溶液后应-20℃冻存

 

相关产品:

产品编号

产品名称

产品编号

产品名称

CA0075

青霉素-链霉素混合溶液(100×)

DM0015

标准革兰氏染色液

CC0005

***酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁)

DZ0040

改良***酚品红染色液

CC0023

D-Hanks平衡盐溶液(1×,无酚红)

DZ0189

戊二醛固定液(电镜专用,2.5%)

CC0130

胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25%:0.02%)

NA0030

Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE)

CS0001

ACK红细胞裂解液

NR0001

DEPC处理水(0.1%)

DA0001

DAPI染色液(5ug/ml)

NR0040

RNase A(10mg/ml)

DA0065

台盼蓝染色液(0.4%)

OR0001

pH标准缓冲溶液(pH=4.00)

DA0057

甲***胺蓝染色液(1%,硼酸盐法)

PE0018

SDS-PAGE凝胶配制试剂盒

DB0082

改良番红O-固绿软骨染色液

DF0135

多聚甲醛溶液(4% PFA)

DC0032

Masson三色染色液

PE0103

丙烯酰胺溶液Acr-Bis(30%,29:1)

DC0041

天狼星红染色液

PI0011

***甲基磺酰氟溶液(PMSF,100mM)

DD0002

EDTA脱钙液

PS0013

RIPA裂解液()

DE0001

碱性***酸酶染色液(钙钴法)

PT0002

Bradford蛋白定量试剂盒

DF0111

中性福尔马林固定液(10%)

PT0013

考马斯亮蓝快速染色液

DG0005

糖原PAS染色液

PW0040

Western blot一抗稀释液

DH0006

苏木素伊红(HE)染色液

PW0060

通用显影液

DJ0001

普鲁士蓝染色液(核固红法)

PW0082

丽春红S染色液(1×Ponceau S)

DK0022

尼氏染色液(焦油紫法)

R00038

IPTG(50mg/ml)

DL0005

苏丹脂肪染色液

R00300

x-gal(20mg/ml)

DM0002

姬姆萨染色液(Giemsa stain,1:9)

NE0056

乙酸钠溶液(3M,pH5.2,RNase free)

 

NG-TOP: 0cm; BORDER-BOTTOM: windowtext 1pt solid; HEIGHT: 13.9pt; mso-border-alt: solid windowtext .5pt; mso-border-left-alt: solid windowtext .5pt; mso-border-top-alt: solid windowtext .5pt" width="120">

SDS

5.0%

Urea

3.0M

Brij-35

5.0%

蔗糖

40%

Lubrol

1.0%

Glycine, pH 2.8

100mM

CHAPS

5.0%

 

相关产品:

产品

产品号

规格

核蛋白提取试剂盒

310001

50 assays

核蛋白提取试剂盒

310002

100 assays

总蛋白提取试剂盒

310003

50 assays

总蛋白提取试剂盒

310004

100 assays

BCA  蛋白定量试剂盒

301001

250 assays

BCA  蛋白定量试剂盒

301002

1000 assays

Bradford  蛋白定量试剂盒

301003

250 assays

Bradford  蛋白定量试剂盒

301004

1000 assays

ECL化学发光检测试剂盒

320001

100ml

ECL化学发光检测试剂盒

320002

200ml

蛋白Marker

320001

1ml

蛋白Marker

320002

2ml