北京/中国Brand,null 产品货号： G7210Item#, PAGE凝胶快速银染试剂盒

PAGE凝胶快速银染试剂盒

货号: G7210

规格: 1L

保存: 室温(15℃-25℃) 干燥保存，复检期12个月。

试剂盒内容： G7210

**银 2g

染色液A 100ml

显色液B 100ml

显色液C 100ml

终止液D 100ml

注：1L 规格指可配制的**银染色液的体积，实际使用次数根据PAGE 胶大小不同而不同。

产品简介:

核酸银染的原理是银离子可与核酸形成稳定的复合物，然后用还原剂如甲醛在碱性环境下使Ag+还原成银

颗粒，可把核酸电泳带染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝胶电泳染色。其灵敏度比EB 高200 倍，该产品

整个过程只需要20 分钟，操作简单，灵敏度高，能检测到10ng 以下的DNA 条带。

操作步骤:

一、染色液配制

需要配制的染色液体积根据PAGE 胶的大小而定，一般的mini-PAGE 胶需要20-30mL。配制用的器皿清洗

干净后用去离子水涮洗，染色液须用去离子水配制，现用现配。如果配制的溶液体积不是100mL，可以按比例

改变各成分用量。

1，**银染液：称取0.2g **银，加入到90ml 去离子水中彻底溶解，加入10ml 溶液A 混匀，现用现配。

2，显色液：分别取溶液B 和溶液C 各10ml 加入80ml 去离子水中混匀，现用现配。

3，终止液：取终止液D 10ml 加去离子水稀释至100ml，现用现配。

二、染色：

1，PAGE 电泳结束后，将PAGE 蛋白胶转移至玻璃平皿或搪瓷盘中，用去离子水漂洗两遍，每次2min。

2，将PAGE 胶转移至**银染液中，使染液没过PAGE 胶，室温染色10min。可置于摇床上缓慢摇晃，使

其染色均匀。

3，弃去染色液，用去离子水快速漂洗三次，每次半分钟。

4，将PAGE 胶转移至显色液中，使显色液没过PAGE 胶，室温摇晃显色至条带清晰可见。

5，可选，将PAGE 胶转移至终止液中，终止显色1min。

6，银染后PAGE 胶可拍照保存或用于后续试验。

注意事项：

1. 银染主要出现在PAGE 胶的表面，使用薄胶（0.5-0.75mm）可以提高灵敏度。

2. 对于考马斯亮蓝染色的SDS-PAGE 胶，可用甲醇将胶漂洗后，继续进行银染。考染过程中的乙酸会干

扰银染，因此要确保将PAGE 凝胶中残留的乙酸彻底洗净。

3. 不同蛋白质对银染的反应是不一样的，尤其是碱性蛋白染色效果差。因此，不宜用银染测定不同蛋白

的比例。

4. 染色过程中，缓慢的振荡是必要的，一般选择40-60 rpm.

5. 凝胶表面的裂纹多是由于压力、手印及表面干燥所致，所以全程中都应带手套操作。

6. PAGE 凝胶背景呈均一的黑色多是水中的杂质引起的，所以溶液的配制应使用电导率小于1 μS 的去离

子水。

7. 如果染色后有呈灰尘或烟雾状灰色或棕色的沉淀出现在凝胶表面，可能是在几步漂洗过程中洗得不够

彻底，或是染色过程时温度太低。

8. 较深的银染背景多是丙烯酰胺中的杂质所致。

9. PAGE 胶中的甘油、尿素、甘氨酸、Triton X-100 和两性电解质这些物质会干扰银染。

10. 室温操作时，温度的波动往往会干扰银染的效果，恒温水浴可以解决这个问题。

11. 凭借戊二醛预处理可以使各种蛋白质的染色提高40 倍。

12. 染色使用的玻璃器皿必须非常干净，用酸浸泡可以满足要求。

13. 银染应尽快照相，随着时间延长，蛋白条带会变浅，而背景会加深。

14. 银染容器最理想的是玻璃平皿，其次是搪瓷盘和密胺塑料盘等。