者生理盐水），冰浴匀浆，10000rpm，4℃离心10min，取上清，即待测液。（动物样品常常需要稀释）

二、吸光值测定：

1. 分光光度计仪预热30 min 以上，调节波长到595nm，蒸馏水调零。

2. 空白管：取1mL玻璃比色皿，加入200μL蒸馏水，1000μL试剂一，混匀后室温静置10min，于595nm

测定吸光度，10~20min 内完成测定，记为A 空白管。

3. 标准管：取1mL玻璃比色皿，加入200μL标准液，1000μL试剂一，混匀后室温静置10min，于595nm

测定吸光度，10~20min 内完成测定，记为A 标准管。

4. 测定管：取 1mL 玻璃比色皿板，加入 200μL 待测液，1000μL 试剂一，混匀后室温静置 10min，于

595nm 测定吸光度，10~20min 内完成测定，记为A 测定管。

蛋⽩质含量计算：

C 待测（g/m L）= C 标准管×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)

=50×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)

C 标准管：标准品蛋白质浓度，50μg/mL。

注意事项：

1．加考马斯亮蓝后，在10~20min 内吸光值相对较稳定，因此须在10~20min 完成比色。

2．不宜用石英比色皿，可用玻璃或塑料比色皿，测完成后立即用95%乙醇冲洗。

3．测定前用1~2 个样做预实验，确保蛋白浓度在0~100g/ml 范围内，否则需要做相应稀释。

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