重组肠激酶

特异性高，纯度高

1.产品简介

雅心肠激酶是一种高纯度的重组牛肠激酶。该酶经HPLC纯化，纯度高，特异性高，并且不含其他蛋白酶。肠激酶（EC 3.4.21.9）是一个特定的蛋白酶，它可以切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点：天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 赖氨酸。肠激酶可去除位于蛋白质N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合标签。

2.产品优势
高纯度
 (图一)   （图二）（图三）

高特异性
1）特定的蛋白酶，切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点：天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 天冬氨酸 - 赖氨酸 (DDDDK)
2）不含其他蛋白酶,无非特异性切割

图一：SDS-PAGE检测结果，纯化的肠激酶一个单一的主带

图二：1U的EK作用于50ug底物0min,10 min,20 min,30 min,40 min,50 min,60 min后的SDS-PAGE分析

图三：1U,2U,5U,10U的EK作用于50ug底物4h后和1U的EK作用于50ug底物16h后的SDS-PAGE分析

 

酶切条件：

按照酶活性定义，重组EK酶切条件举例：25mM Tris-HCl 8.0体系中：

融合蛋白浓度  0.1-1mg/ml （蛋白总量50-100μg）

重组EK用量   1-2U 

温度          25℃

过夜酶切，或完全酶切需12h-16h。

 

常见影响肠激酶活性的因素

在＞200mM 咪唑，或＞200mMNaCl，或＞5%甘油，酶切效果受影响。可参照以下推荐方法进行酶切：

1）为获得理想酶切结果，请将样品透析到25mM Tris-HCl 8.0缓冲液中，再进行酶切。

2）若不便透析，可将样品稀释，咪唑含量在100mM以下，NaCl浓度在50mM以下，甘油浓度小于5%以下进行酶切，酶的用量与蛋白的比例不变（即1U酶切50μg蛋白）。

3）如果样品溶液中含有上述成分中的一种或多种，且不便去除，此时适当增加酶量或延长酶切时间，也可达到较好酶切效果。

 

3.产品用途

用于去除位于蛋白质N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合标签

 

4.产品特性

来源	重组大肠杆菌
分子量	理论MW：25,850DA
活性	1U定义为在25℃，12h~16h之内，将50ug保存于 25mM Tris-HCl 8.0缓冲液中的融合蛋白切割95%所需的酶量。
储存	储存在-20℃.
稳定性	可以在常温下运输，在25℃，可稳定保存一周。 酶液可反复冻融数次，对酶活无影响。

 

5.产品信息

产品名称	产品编号	活性	包装	产地
重组肠激酶	EK0801	≥10u/μl ≥50u/μl	100u 1ku 1MU	上海雅心