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S8831-25ml	Solarbio	25ml	800.00元

S8831  Phenyl -Sepharose 6FF产品介绍

产品说明:分离试剂，层析介质。

颗粒大小：45-165um；

最高流速：600cm/h；

每毫升载量：20微摩尔***基Phenyl；

每毫升结合量：10mg lgG，24mg HSA；

适合纯化含芳香族(aromatic)配体的蛋白，特别是单抗。

 保存：

产品应密封贮存在 4℃~30℃（保存溶液为 20% 乙醇+0.1M 醋酸钠），通风、干燥、清洁的地 方。不能冷冻。用过的柱子贮存在 4℃（20% 乙醇）。保质期 5 年。

产品说明：

***基-琼脂糖凝胶 6FF 是将***基键合在 6FF 琼脂糖微球上形成的一种可利用疏水相互作用来实 现目标产品纯化分离的疏水类介质。用于生物大分子和乙肝疫苗的纯化分离。本品为白色球状凝胶, 无嗅、无味、无肉眼可见杂质。

项 目       指 标

配基： R-OCH2-CH(OH)-CH2-O-C6H5

基质： 6% 交联琼脂糖

形状： 球形

粒径 ：45~165 μm

蛋白质吸附容量（HSA）： 36mg/ml(高)；24mg/ml(低)

最高流速(25℃) ：100KPa 下 200 cm/h *

耐压： 0.2 MPa

工作温度： 4~40℃ pH

适用范围：2~14（短时间 ，在位清洗）；3~13（长时间）

化学稳定性 以下溶液中稳定： 1mol/L NaOH；70% EtOH；30%异丙醇； 0.5%SDS；6mol/L 盐酸胍；8mol/L 尿素；3 mol/L(NH4)2SO4 *

柱子：内径 16mm、柱长 10cm，柱床高 5cm，25℃，流动相为 0.1mol/LNaCl。

S8831  Phenyl -Sepharose 6FF使用说明：

 1. 装柱

（1）让所有的材料和试剂达到室温。配制初始缓冲液（平衡液）和洗脱缓冲液。

（2）根据柱子大小取所需量的凝胶，清洗掉 20%乙醇，抽干，用初始缓冲液（按凝胶：缓冲 液=3：1 的比例）配成匀浆。

（3）将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位（液面略高于滤膜），务必使底端 无气泡。

（4）用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意勿使产生气泡。打开柱子出液口，使凝胶在柱内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。

（5）打开蠕动泵，让缓冲液用使用时流速的 1.33 倍的流速流过，使柱床稳定。用 2~3 柱体积 的缓冲液平衡柱子。

2. 平衡

让平衡缓冲液以一定流速流过柱子，到流出液电导和 pH 不变。平衡缓冲液一般是高盐浓度的 缓冲液，如 0.02~0.05mol/L 的 PBS 加 1~2.5mol/L(NH4)2SO4等。

3. 上样

（1）样品用平衡液配制，浑浊的样品要离心和过滤后上样。

（2）一般情况是让目标产品结合在柱子上，用平衡液洗去杂质，再选择一种洗脱液洗下目标 产品。

（3）介质对样品组分吸附的程度取决于样品的疏水性质、流动相的离子强度和温度。盐浓度 大、温度高或样品组分疏水性强，介质对组分吸附牢。

4. 洗脱

疏水介质可用减小盐浓度进行洗脱。加表面活性剂或有机溶剂可加强洗脱。最常用的洗脱液是 低盐浓度缓冲液，如 0.02~0.05mol/L 的 PBS。

5. 再生

一般用低盐浓度的缓冲液洗，洗 10 倍以上柱体积，接着用结合蛋白的平衡液洗到平衡，可再 次使用。 若有失活蛋白质或脂类物质在再生时洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。

6. 在位清洗

（1）对于以离子键结合上去的蛋白，可以用 2M Nacl 去除。

（2）对沉淀蛋白、对以疏水性结合的蛋白或脂类，可用 1M NaOH 去除。

（3）对强疏水性结合的蛋白、脂类等，用 4~10 倍柱体积的 70%乙醇或 30%异丙醇清洗，但要 注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加，否则容易产生气泡。 清洗完毕后，用至少 3 倍缓冲液平衡柱子。

7. 去热源

用0.5M 的氢氧化钠清洗柱子 5~6 小时或用 0.1M 的氢氧化钠 24 小时。或用以下方法步骤去除：

（1）2 倍柱体积的 70%乙醇；

（2）2 倍柱体积 50mM Tris-Hcl pH7.5；

（3）1 倍柱体积 4M 尿素； （4）3 倍柱体积的 Tris 缓冲液+0.1M NaCl； 上缓冲液都在无热源的双蒸水中配制。

8. 消毒

用 0.5~1M NaOH 室温下洗 8~10 倍柱体积，初始缓冲液平衡柱子。

S8831  Phenyl -Sepharose 6FF注意事项：

1. 上样之前，样品必须去除色素，否则色素会被吸附到填料上，影响填料的正常使用。

2. 运输中应避免日晒、雨淋、重压，严禁与有毒、有害物品混运。

3. 在装柱、使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干，气泡进入。

 

 

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