目前用于实验研究及药物靶点筛选的siRNA合成方法主要有两种:载体介导表达siRNA和化学合成siRNA。化学合成siRNA具有沉默效率较高的优点,但在体内的作用时间较短,且一次性消耗,无法获得克隆;构建siRNA质粒可以在E.coli内复制扩增,真核细胞内作用时间较长,且质粒可长期保存,同时可测序保证其100%序列同源性。 本公司提供完善的siRNA质粒构建技术服务。 本公司提供siRNA质粒的构建服务,采用U6、H1双启动子siRNA表达载体,可以在细胞内直接转录出siRNA,行使其RNAi功能,GFP可以监测转染效率。本公司还可提供shRNA表达载体,并且可以提供shRNA质粒构建,腺病毒载体 (Adenoviral),慢病毒载体(Lentiviral),逆转录病毒载体 (Retroviral) 病毒型载体构建服务。 基于载体的siRNA构建流程: 1、客户可选: 提供靶基因的siRNA序列,由本公司将其克隆到siRNA表达载体上。 提供靶基因的相关信息(基因的mRNA序列或Genbank Accession No.),根据客户要求,本公司负责设计高效特异性的3-4条针对靶基因的siRNA,将其克隆到siRNA表达载体上。 也可根据需要,提供商业化的siRNA表达载体。 2、合成设计好的DNA序列,将其克隆到客户要求的载体上,并通过测序进行验证。 3、构建成功的siRNA质粒连同测序文件、产品说明书一起寄送到客户手中。 注:根据客户要求还可以提供siRNA的阳性及阴性对照质粒。
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