RNeasy Mini kit
英文名称: RNeasy Mini kit
型号:null    产品货号: 74106
价格:请致电:010-57128832,18610462672
品牌: qiagen

RNeasy Mini Kit 可从少量起始样本中(最多30 mg 组织或 1 x 107 细胞)有效纯化总 RNA (见图 "RT-PCR of RNA from 100 Cells")。总RNA可方便地从动物细胞及组织、革兰氏阳性或革兰氏阴性细菌*或酵母(见表"Total RNA Yields Obtained with RNeasy Mini Kits" 和图"High-Quality RNA from a Variety of Samples")中纯化出来。还提供从真核细胞中分离细胞质RNA,回收未完全纯化的RNA、体外转录和酶促反应得到的RNA。此外,QIAGEN提供其他特殊应用的操作方法,包括真空处理RNeasy mini 分离柱的流程,还可用QIAshredder Homogenizers 方便地将细胞裂解物匀质化。

* 提供溶菌酶 (细菌样品必需)。
不提供溶壁酶、消解酶、玻璃微珠 (酵母样品必需)。
‡需要加入额外的缓冲液。实验方法中提供缓冲液配方。

RNeasy Mini Kit 特性

规格:带1.5 ml 和2 ml 收集管的Mini离心柱
起始样本量: 10 - 1 x 107 细胞;0.5-30 mg 组织;<5 x 107 酵母细胞
制备时间:20 分钟
结合能力:最多 100 µg RNA
产量:根据样本类型不同而有所不同, 见
洗脱体积:30-100 µl

RNeasy技术将高效的的异硫*酸胍裂解技术与快速高纯度的硅胶膜纯化技术相结合,使总RNA分离变得简单化。该技术无需通过氯化铯(CsCl)梯度离心或氯化锂/乙醇沉淀。RNeasy样本制备技术已被完全注册,纯化得到的核酸可用于任何分子检测或其他下游应用中,而无侵犯专利的风险。

RNeasy试剂盒提供高品质RNA,几乎无DNA残留。对微量DNA非常敏感的RNA应用,残留的DNA可在RNeasy流程中使用RNase-Free DNase Set方便地通过DNA酶柱上消化去除。

Total RNA yields obtained with the RNeasy Mini Kit

起始样品   平均产量(µg)
动物细胞
LMH (1 x 106)
HeLa (1 x 106)
COS-7 (1 x 106)
淋巴细胞(未刺激)(1 x 106)
 
12
15
35
0.5
小鼠组织
肝脏(10 mg)
肺 (10 mg)
脾(10 mg)
 
40
10
35
酵母细胞
S. cerevisiae (1 x 107)
 
25

* 提供溶菌酶、消解酶或玻璃珠(处理酵母细胞需要)。
 由于发育期、种类和生长条件的不同所需的量也不同。由于应用RNeasy 处理可富集 >200 nt的RNA,RNA 产量不包括5S rRNA、tRNAs或其他小分子RNA。

操作流程

首先裂解并匀质化样品。在裂解液中加入乙醇来提供合适的结合条件,接着将裂解液上样到RNeasy硅胶膜上。RNA与硅胶膜结合,有效洗涤去除其他各种污染物。最后将浓缩的纯RNA洗脱到无RNA酶的水中。

应用

经RNeasy技术纯化得到的RNA,A260/A280比值可达1.9-2.1(测于10 mMTris-Cl,pH7.5),非常适合于各种下游应用,包括: