适用于从不含细胞的体液标本中纯化病毒RNA。
· 20-40分钟内即可完成体液中总核酸的制备。
· 补加的Carrier RNA有效提高病毒的检测敏感性(稳定检测到500 copies/ml RNA病毒,最高达到100 copies/ml RNA病毒)。
· 无须酚氯仿抽提及异丙醇沉淀步骤。
· 适合从不含细胞的体液样品(包括血浆、血清、尿液、 CSF及细胞培养上清)纯化病毒RNA。
· 起始样品体积:100 µl体液。
· 所获的核酸不含杂质及抑制物,可使用多至1/2反应体系体积的模板进行扩增。
· 最高可达90% 的病毒RNA回收效率。


曲线1:用simgen病毒RNA纯化试剂盒从100 µl 5×105copies/ml的HCV血清中提取的RNA作为模板检测HCV所获得的扩增曲线(RT-PCR一步法,50 µl扩增体系中加入25 µl纯化的RNA)。
曲线2:用传统的Trizol法(添加糖原助沉)从100 µl同一 5×105copies/ml的HCV血清中提取的RNA作为模板检测HCV所获得的扩增曲线(RT-PCR一步法,50 µl扩增体系中加入全部纯化的RNA)。
产品原理
体液样品经裂解液溶解变性后,用柱纯化核酸技术过滤除去变性的蛋白及杂质,吸附在纯化柱上的核酸经Buffer WA和Buffer WB洗涤后,可彻底清除残留在纯化柱上的杂质及PCR抑制物。纯化柱上的核酸可直接用Buffer TE或水洗脱,并可直接用于各种分子生物学实验。
操作步骤
在体液样品中加入含Carrier RNA的Buffer L溶解病毒,再加入乙醇调整裂解液的柱结合条件。病毒核酸在纯化柱上经过结合、清洗步骤去除残留的杂质后,即可被TE溶液洗脱下来。
可适用的分子生物学实验
RT-PCR