PowerWater® RNA Isolation Kit,强力水样微生物总RNA提取试剂盒
英文名称: PowerWater® RNA Isolation Kit
型号:null    产品货号: 14700-50-NF
价格:请致电:010-57128832,18610462672
品牌: usa

 

     有晴生物正式签约代理Mobio,将协助您高效处理复杂样本。

 PowerWater® RNA Isolation Kit专门设计用于提取各种已过滤好水样滤膜的总RNA。使用了我们专利的抑制因子去除技术(Inhibitor Removal Technology®),进验证,可从富含抑制因子的水样中获得高质量RNA。兼容市面上所有常见类型滤膜,可选用我们的灭菌过滤装置。提供了RNase-Free DNase I,提取过程中消化掉基因组DNA,节省事后处理时间。

PowerWater® RNA Isolation Kit使用前,先把水样过滤到滤膜上。可从MOBIO单独购买已消毒的带滤膜一次性过滤装置,或用户自备。把过滤好水样的滤膜放入特配研磨珠的厚壁研磨管。加入专利的裂解缓冲液以增强陷入滤膜孔内微生物的裂解作用,涡旋振荡充分均质化样品。去除蛋白和抑制因子后,总RNA选择性吸附到MOBIO的硅胶离心柱上,DNase I消化基因组DNA,经过清洗,洗脱RNA。此时,最终RNA可直接用于RT-PCR、qRT-PCR、cDNA 合成等RNA应用。

聚***砜0.22μm滤膜提取的水样总RNA,上条带为23s rRNA,下条带为16S rRNA  

凝胶电泳中RNA出现降解

β***可破坏RNase,需要现加现用。若依然出现RNA降解,可能要注意以下原因:

*  新鲜采样,若水样不能立刻处理,4℃保存。室温或-20℃保存,会导致RNA降解损失。

*  根据样品现用现配PWR1与β***混合液。

*  非变性凝胶不能跑RNA。关于变性凝胶跑RNA,详见电泳部分。

*  RNA降解成小片段甚至单个核苷酸可增加260吸光值,所以260/280读数可反应RNA质量。比值大于2.3即表示RNA出现降解。

A260/280读数偏低

纯净的RNA此读数因为1.9-2.1。若比值低于1.6,表明RNA有蛋白污染。

*  检查流程,DNase I消化后必须用PWR7溶液进行冲洗。

*  UV分光光度计法检测的样品水溶液pH过低也会影响280对蛋白的检测的灵敏度*。用10mM Tris pH 7.5稀释RNA,重新测定260/280.

*Wilfinger, W.W., Mackey, M., and Chomczynski, P. (1997) Effect of pH and ionic strength on the spectrophotometric

assessment of nucleic acid purity. BioTechniques 22, 474.

最终RNA有基因DNA污染

PowerWater® RNA Isolation Kit提供了高质量的RNase-free DNase I用于离心柱上的DNA消化。使用试剂盒提供的PWR6溶液,DNase I的活性可以充分发挥。

*  必须使用试剂盒提供的缓冲液制备DNase I。

*  保证15min的消化孵育时间。缩短孵育时间可导致基因组DNA消化不完全。孵育过程RNA不会被降解。你也可以最多把DNase I孵育效果过程延长至30min。

强力水样微生物总RNA提取试剂盒