北京厚生博泰科技有限公司
Beijing Hooseen Biotech Co.,Ltd.
DNA产物纯化试剂盒
DNA PurificationKit
(目录号:HS0202)
产品包装
试剂盒成分 | 50 preps | 100 preps |
Buffer PB | 40 ml | 80 ml |
Buffer PW | 50 ml | 100 ml |
Buffer EB | 10 ml | 10 ml |
Spin Columns CA | 50个 | 100个 |
Collection Tubes (2 ml) | 50个 | 100个 |
保存条件
室温(15 ~25℃)
产品简介
本试剂盒用于从PCR反应液或各种酶促反应液中纯化回收DN**段。该试剂盒采用特殊的吸附膜,能有选择性地吸附核酸分子,去除反应液中的各种酶蛋白、引物、dNTP等,得到高质量的DNA纯化产物。
该试剂盒操作简便,质量稳定,得率高,得到的DN**段可直接用于酶切、连接、测序、PCR模板等后续的实验。
产品特点
1. 快速:步骤少,操作简便,整个操作仅需十几分钟。
2. 简便:离心吸附柱Spin Columns CA不需要预平衡,漂洗液Buffer PW不用另加酒精,即开即用。
3. 高效:每个离心吸附柱可吸附10 ug以上的DN**段,回收效率在80%以上。
4. 稳定:正确保存条件下一年内提取效果不发生变化。
注意事项
1. 本试剂盒在室温(15 ~25℃)、干燥条件下可稳定保存12个月,更长时间的保存可置于2~8℃。如溶液产生沉淀,使用前应先将试剂盒内的溶液在室温中放置一段时间,必要时可在37℃水浴溶解,用后及时将瓶盖盖紧。
2. 所有操作都应在室温进行,操作过程中应注意防护,不要将溶液溅到皮肤上,眼睛里。
3. 回收的量与起始DNA的量、洗脱体积、DN**段的大小有关。一般回收的量为5 ~ 20 ug,大小为100 bp ~ 10kb的DN**段,回收率达85 ~ 95%,更大或更小的DN**段回收率较低。
操作步骤
1. 估计PCR反应液或酶切反应液的体积,向其中加入5倍体积的Buffer PB,充分混匀(无需去除石蜡油或矿物油)。
【注意:如PCR体系为50ul(不包括石蜡油体积),则加入250 ul结合液PB】
2. 将上一步所得溶液加入离心吸附柱Spin Columns CA中,室温静置2min,让DN**段与吸附柱中的硅胶膜充分结合,然后12,000 rpm离心1 min,弃收集管中废液。
(注意:如总体积超过750ul可分2次将溶液加入同一离心吸附柱中;为增加目的DN**段的洗脱浓度,也可将多管溶液加入到同一离心吸附柱中)
3. 加入500 ul的Buffer PW,室温静置2 ~ 5 min,然后12,000 rpm离心1min,弃收集管中废液。
(注意:漂洗液Buffer PW中有酒精,用后应立即盖紧瓶盖,以防酒精挥发)
4. 重复步骤3一次。
(注意:小于500bp或浓度较低的样品不重复此步骤。一般样品不进行此步骤纯度完全满足下游酶切、连接等实验的要求)
5. 将离心吸附柱于12,000 rpm离心2 min,甩干残留漂洗液。
(注意:此步不能省略,否则残留乙醇会影响后续实验)
6. 将离心吸附柱置于一个新的1.5 ml塑料离心管中,在吸附柱中央加入30 ~ 50 ul洗脱液Buffer EB,室温放置2min,12,000 rpm离心1 min收集DN**段。
(注意:为增加回收效率,可将洗脱液Buffer EB在50~60℃预热,也可将得到的溶液重新加入到离心管中,室温放置2min,再次离心收集。如需使用去离子水洗脱,可用NaOH调整其pH值在7.0~ 8.5之间)

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电话:18010069130