DNA 产物纯化试剂盒
英文名称: DNA Purification Kit
型号:null    产品货号: HS0202-1
价格:请致电:010-57128832,18610462672
品牌: 北京厚生博泰生物技术有限公司
试剂级别: 分子生物学级

北京厚生博泰科技有限公司

Beijing Hooseen Biotech Co.,Ltd.

 

DNA产物纯化试剂盒

DNA PurificationKit

(目录号:HS0202)

产品包装

试剂盒成分

50 preps

100 preps

Buffer PB

40 ml

80 ml

Buffer PW

50 ml

100 ml

Buffer EB

10 ml

10 ml

Spin Columns CA

50

100

Collection Tubes (2 ml)

50

100

保存条件

室温(15 ~25℃)

 

产品简介

本试剂盒用于从PCR反应液或各种酶促反应液中纯化回收DN**段。该试剂盒采用特殊的吸附膜,能有选择性地吸附核酸分子,去除反应液中的各种酶蛋白、引物、dNTP等,得到高质量的DNA纯化产物。

该试剂盒操作简便,质量稳定,得率高,得到的DN**段可直接用于酶切、连接、测序、PCR模板等后续的实验。

 

产品特点

1. 快速:步骤少,操作简便,整个操作仅需十几分钟。

2. 简便:离心吸附柱Spin Columns CA不需要预平衡,漂洗液Buffer PW不用另加酒精,即开即用。

3. 高效:每个离心吸附柱可吸附10 ug以上的DN**段,回收效率在80%以上。

4. 稳定:正确保存条件下一年内提取效果不发生变化。

 

注意事项

1. 本试剂盒在室温(15 ~25℃)、干燥条件下可稳定保存12个月,更长时间的保存可置于2~8℃。如溶液产生沉淀,使用前应先将试剂盒内的溶液在室温中放置一段时间,必要时可在37℃水浴溶解,用后及时将瓶盖盖紧。

2. 所有操作都应在室温进行,操作过程中应注意防护,不要将溶液溅到皮肤上,眼睛里。

3. 回收的量与起始DNA的量、洗脱体积、DN**段的大小有关。一般回收的量为5 ~ 20 ug,大小为100 bp ~ 10kb的DN**段,回收率达85 ~ 95%,更大或更小的DN**段回收率较低。

 

操作步骤

1. 估计PCR反应液或酶切反应液的体积,向其中加入5倍体积的Buffer PB,充分混匀(无需去除石蜡油或矿物油)。

【注意:如PCR体系为50ul(不包括石蜡油体积),则加入250 ul结合液PB】

2. 将上一步所得溶液加入离心吸附柱Spin Columns CA中,室温静置2min,让DN**段与吸附柱中的硅胶膜充分结合,然后12,000 rpm离心1 min,弃收集管中废液。

(注意:如总体积超过750ul可分2次将溶液加入同一离心吸附柱中;为增加目的DN**段的洗脱浓度,也可将多管溶液加入到同一离心吸附柱中)

3. 加入500 ul的Buffer PW,室温静置2 ~ 5 min,然后12,000 rpm离心1min,弃收集管中废液。

(注意:漂洗液Buffer PW中有酒精,用后应立即盖紧瓶盖,以防酒精挥发)

4. 重复步骤3一次。

(注意:小于500bp或浓度较低的样品不重复此步骤。一般样品不进行此步骤纯度完全满足下游酶切、连接等实验的要求)

5. 将离心吸附柱于12,000 rpm离心2 min,甩干残留漂洗液。

(注意:此步不能省略,否则残留乙醇会影响后续实验)

6. 将离心吸附柱置于一个新的1.5 ml塑料离心管中,在吸附柱中央加入30 ~ 50 ul洗脱液Buffer EB,室温放置2min,12,000 rpm离心1 min收集DN**段。

(注意:为增加回收效率,可将洗脱液Buffer EB在50~60℃预热,也可将得到的溶液重新加入到离心管中,室温放置2min,再次离心收集。如需使用去离子水洗脱,可用NaOH调整其pH值在7.0~ 8.5之间)


 

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