产品说明
蔗糖(C12H22O11)是葡萄糖和果糖通过α-1,2-糖苷键连接的双糖。它是最常见的食品甜味剂和植物中最重要的糖份。在哺乳动物的胃中，蔗糖易被消化分解成葡萄糖和果糖，然后迅速被吸收进入小肠血液。简单、直接和高通量的蔗糖浓度检测手段受到了广泛应用。本公司的改良了试剂，采用转化酶将蔗糖分解为果糖和葡萄糖，然后使用果糖检测试剂定量检测果糖浓度。在波长565nm下检测，其颜色深浅程度与样品中的蔗糖浓度成正比。
产品特点
不受葡萄糖干扰。用20 mL样品，检测范围：17 - 2000 mM蔗糖。
产品用途
1. 检测生物样品(如血清、血浆、尿液、唾液、奶液、培养基)、食品、果汁、饮料和其他农产品中蔗糖的含量。
2.  用于药品和药理学研究，检测药物对蔗糖代谢的影响。
试剂盒组成(96孔板供100份检测)
   缓冲液:       10  mL                 转化酶: 120 mL       
   PMS试剂:  1.5 mL                 酶试剂: 120 mL                                      
   MTT试剂:  1.5 mL                 标准品:  400 mL 40 mM 蔗糖
   
储藏条件： 冰冻运输，-20°C 保存。保质期3个月。
预防措施：本产品仅供研究用。使用过程中应严格遵循实验安全措施。
测试步骤
注：(1) 样品中应避免以下干扰物质：抗坏血酸，SDS (>0.2%)、叠氮化钠、NP-40 (>1%) 和 吐温-20 (>1%)。(2) 该项测试基于反应动力学，为了确保培养时间相同，向标准品和样品添加工作试剂时应当迅速并且快速充分地混合。
样品处理：液体样品(如血清、血浆和果汁)可直接测定。对于奶液，应将600 mL奶液与100mL 6N盐酸混合使其澄淀，14000 rpm离心5分钟。将 300 mL 上清液放入一个干净的试管并加入50 mL 6 N 氢氧化钠。用该试剂进行测试(稀释系数n = 1.36)。
1. 使用前，须将试剂放置至室温并摇匀，实验过程中把解冻后的酶和试剂管置于冰上。
2.标准: 将12 mL 40 mM 标准品与 228 mL 蒸馏水混匀(最终浓度 为2000 mM)，按照下表比例，用蒸馏水稀释标准品。
No
2000 mM 标准品  +  H2O
Vol (mL)
蔗糖 (mM)
1
100 mL +    0 mL
100
2000
2
   60 mL +  40 mL
100
1200
3
  30 mL +  70 mL
100
  600
4
    0 mL +100 mL
100
      0
取透明平底96孔板，将20 mL 稀释的标准品和样品放入不同的孔中。 
注：如果已知样品中含有果糖，应另外准备加有20 mL样品的样品对照孔。
3. 颜色反应：按如下比例为每个标准和样品孔配制足量的工作试剂：将 56 mL 缓冲液， 1 mL 转化酶， 1 mL 酶试剂，14 mL PMS 试剂 和14 mL MTT 试剂混匀。将80 mL 工作试剂加入各个孔中。 
注：对含果糖的样品，制备不含转化酶的空白对照，即：56mL 缓冲液，1mL 酶试剂，14mL PMS 试剂 和14mL MTT 试剂混匀。 向样品对照孔加入80 mL对照试剂。
立即轻敲孔板使其混合。室温下培养一小时。
 
4. 在565nm (520-600nm) 读取吸光度。
注：若计算出样本的蔗糖浓度高于2000mM，需用水稀释样本并重复检测，结果需乘稀释系数n。
浓度计算
用标准品的吸光度减去水空白值(4号)，对标准品浓度作图并得出斜率。样本的蔗糖浓度计算如下：
OD样品, OD空白 分别是样品和水的吸光度；若样品含果糖，OD空白为空白对照的吸光度。n是稀释系数。 
单位换算：1 mM 蔗糖相当于34.2 mg/dL，0.034% 或342 ppm。
实验必需品(未提供)
吸液用仪器，离心管，透明平底96孔板，96孔板吸光率阅读器。