EMSA探针-YY1
型号:null    产品货号: GS106
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品牌: 江苏

EMSA探针-YY1

结合的转录因子,通常有两种方法:1、凝胶迁移试验(EMSA);2、构建一系列启动子缺失或突变的报告载体。前者更适用于对转录因子与启动子之间相互作用的验证,但在寻找可与启动子结合的转录因子方面作用有限。后者需要构建一系列启动子缺失或突变的报告载体,通过检测报告基因的表达来确定转录因子在启动子上的结合位点,整个过程繁琐、耗时。Signosis开发了一种基于微孔板杂交的快速检测方法,这种方法可以同时检测48或96种转录因子是否与待研究启动子结合。
A. 产品优势 
多重复合——一次实验可分析48或96种转录因子是否与待研究启动子结合;
步骤简单——只需探针孵育、柱离心、板杂交和HRP酶化学发光检测。
B.  技术原理 
          转录因子(结合启动子)微孔板芯片检测试剂在转录因子活性微孔板芯片检测试剂的基础上引入了启动子序列与探针的竞争机制。该产品是在转录因子活性微孔板芯片检测试剂的探针混合物中加入一段待研究启动子序列,如果启动子序列中含有转录因子结合位点,就会与生物素标记的探针竞争性结合转录因子,导致该转录因子与相应探针形成的复合物减少。通过对有无待研究启动子序列的检测结果进行比较,可以分析出转录因子是否与该启动子结合。
C.原理示意图 
 

D. 结果展示 
使用转录因子(结合启动子)微孔板芯片检测试剂检测三种样本。实验中所用的PMA可以活化AP1和NFκB两种转录因子。没有经过PMA处理的对照组HeLa细胞核提取物与探针混合物(蓝色);经过PMA处理的HeLa细胞核提取物与探针混合物(红色);经过PMA处理的HeLa细胞核提取物与探针混合物加上IL6启动子DN**段混合(黄色)。