RiboMAX™ Large Scale RNA Production System—T7

产品组分
1 x10ul               SP6 or T7 Linear Control DNA
1 x110u               RQ1 RNase-Free DNase
1 x1.25ml            Nuclease-Free Water
1 x120ul             Enzyme Mix, SP6 or T7 RNA Polymerase
1 x100ul             rUTP, 100mM
1 x100ul             rCTP, 100mM
1 x100ul             rATP, 100mM
1 x100ul             rGTP, 100mM
1 x1ml                 Sodium Acetate, 3.0M (pH 5.2)
1 x240ul             SP6 Transcription Buffer, 5X or T7 Transcription Buffer, 5X

RiboMAXTM Large Scale RNA Production Systems (a-d)
(RiboMAXTM大量RNA制备系统)在1ml的反应中能够制备2-5mg/ml的RNA，产量稳定，大约是常规Riboprobe®系统转录反应制备RNA的10-20倍。RiboMAXTM系统反应与Riboprobe®系统的基本区别有三方面：使用HEPES (pH 7.5) 缓冲液而不是Tris-HCl (pH 7.9)缓冲液；rNTP和镁离子浓度提高到既适合SP6也适合T7 RNA聚合酶的水平(1)；反应中还加入了无机焦***酸酶。在兔网织红细胞体外翻译系统中，使用RiboMAXTM系统合成的RNA比常规方法合成的RNA获得的体外翻译结果要好(2)。它减少了对翻译有抑制作用的组分，从而更适合要求具有生物活性的RNA的实验应用。由于RiboMAXTM系统能够制备大量RNA，因此不建议用此系统来制备具有高特异活性的RNA探针。

特点
  • 灵活 ：系统可用于SP6和T7 RNA聚合酶。
  • 反应体系可调：反应规模可放大或缩小，以适应不同量RNA的 制备需要。
  • 高质量：合成高质量的翻译级RNA。

用途
  • 为体外或体内翻译反应制备大量加帽或不加帽的RNA转录子。
  • 在体外合成tRNA、rRNA、RNA病毒基因组和核酶。
  • 制备用于RNA剪切、RNA二级结构、反义RNA和RNA:蛋白质相 互作用研究的底物。
  • 为进行非哺乳动物RNA干扰研究合成长RNA。

操作手册       Technical Bulletin TB166

储存条件：储存于-20℃。

参考文献
1. Gurevich, V.V. et al. (1991) Anal. Biochem. 195, 207–13.
2. Beckler, G.S. (1992) Promega Notes 39, 12–6.

技术资料

RNA Synthesis Systems Brochure BR150
Promega Notes PN060, PN061, PN067, PN074, PN086

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