缺失3’→5’外切酶活性的Klenow片段

DNA Polymerase I Klenow Fragment exo-

 

● 3’末端加dA尾

● 用随机引物制备探针

● 随机引物法标记

 

      Klenow片段(3´→5´exo-) 是DNA聚合酶I的N末端截短物，它保留了DNA聚合酶活性，但失去了5´→3´核酸外切酶活性；该酶经突变 (D355A，E357A) 进一步去除了其3´→5´核酸外切酶活性。 
 

贮存缓冲液
25 mM Tris-HCl pH 7.4,  0.1 mM EDTA,  1 mM DTT,  50% glycerol
 

反应缓冲液 (10 × Blue Buffer)
100 mM Tris-HCl pH 7.9,  500 mM NaCl,  100 mM MgCl2,  10 mM DTT
 

来源
克隆有来自E.coli DNA Polymerase I Klenow Fragment exo-基因的重组E. coli菌株。
 

单位定义
37℃、30分钟内使10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量，定义为1个活性单位 (U)。