Access RT-PCR System

Access RT-PCR System(a,b)用于从总RNA或mRNA中用逆转录和PCR方法扩增特异的目的RNA序列(1)。这种单管、双酶系统是一种灵敏、快速、结果可重复的RNA分析方法，可用于低丰度RNA。该系统利用禽成髓细胞瘤病毒(Avian Myeloblastosis Virus)的AMV逆转录酶(AMV RT)合成cDNA第一条链，用来自Thermus flavus(2)的Tfl DNA聚合酶进行cDNA第二条链的合成及DNA扩增。AccessRT-PCR系统中优化的单一缓冲液系统可非常灵敏地检测RNA转录子，在逆转录和 PCR扩增步骤之间不需另外添加缓冲液，简化了操作步骤，减少了样品污染的机会。此外，AMV逆转录酶在较高温度经过改良，配合AMV/ Tfl 5 X反应缓冲液，能减少由于RNA二级结构引起的问题。

特点 

 • 实现最大可控性: 每一种组分都装在单独的管子中，使你能控制每一步反应，优化Mg2+浓度、建立一个无逆转录酶的对照反应，等等。 

 • 使用更少的模板: 可使用少至1pg的总RNA或mRNA为模板。

• 不需要增加缓冲液: 5X AMV/Tfl 缓冲液可优化酶的活力，从而在逆转录和DNA扩增步骤之间不需另外添加缓冲液。 

 • 品质保证: Promega公司的PCR系统，酶和试剂被证明在PCR中能得到可靠高效的结果。 

 • 可定制或批量订购:想要了解更多此产品的定制选项，请浏览： www.promega.com/myway/

操作手册  

Technical Bulletin          TB220

储存条件: 所有组分储存于–20°C。若长期保存，阳性对照RNA连同包装须储存于–70°C。

参考资料
1. Miller, K. and Storts, D.R. (1995) Promega Notes53, 2–5.

2. Kaledin, A.S. et al.(1981) Biokhimiia46, 1576–84.