pTRE-Cycle1载体如何构建：

质粒载体 即，在由限制性核酸内切酶修饰过的质粒DNA序列中插入外源的目的基因，以质粒为载体，将目的基因通过转化或转导的方法导进宿主细胞，进行重组、筛选、扩增的过程。

包括三部分：遗传标记基因，复制区，目的基因。

pTRE-Cycle1图谱：

1，该质粒的用途：筛选，扩增，表达，还是报告？用一种低拷贝数的质粒来扩增目的片段显然不如高拷贝的质粒效率高；

2，pTRE-Cycle1的宿主：原核质粒？酵母质粒？真核细胞质粒？

3，使用有无特殊要求：抗性，营养缺陷？

4，关键是研究：多克隆位点，上下游的限制酶位点是否合适，对于你要插入的目的片段，是否有高效、经济的酶切位点；启动子是什么诱导机制？起始密码子和终止子的位置？如果插入你的目的片段，是否会移码或提前终止？

5，如果你选用的是比较冷僻的限制酶，pTRE-Cycle1在多克隆位点外是否有该酶的酶切位点；

1. 标签蛋白序列或报告基因序列在插入片段的上游还是下游？对后续实验有无影响？XY880926 大提柱式真菌DNAOUT 4次

XY880803 柱式动物线粒体DNAOUT，PCR级 50次

XY8120501 柱式动物线粒体DNAOUT，测序级 15次

XY8130831 丝状真菌线粒体DNAOUT 15次

XY8120406 柱式植物叶绿体DNAOUT 10次

XY8101101 线状DNA清除剂 30次

XY860707 细菌DNAOUT 50次|250次

XY860802 柱式细菌DNAOUT 50次(A)|50次(B)

XY880927 大提柱式细菌DNAOUT 4次(A)|4次(B)

XY860806 一步式细菌DNAOUT 50次

XY870702 分枝杆菌DNAOUT 50次

XY870703 柱式分枝杆菌DNAOUT 50次

XY860701 土壤DNAOUT 30次|100次

XY871205 柱式土壤DNAOUT 50次

XY880928 大提柱式土壤DNAOUT 4次

XY8101112 柱式水样DNAOUT 50次

XY83674 一管式病毒DNAOUT 50次|200次

XY870701 柱式病毒DNAOUT 50次

XY880921 96孔板病毒DNAOUT(离心法) 1次|5次

XY880101 一管式病毒DNA-RNAOUT 50次

XY870202 柱式酵母质粒DNAOUT 50次

XY890607 柱式BAC DNAOUT 50次

XY890608 中提柱式BAC DNAOUT 5次

XY860205 柱式质粒 DNAOUT 50次|100次

XY8120601 革氏阳性细菌质粒DNAout 50次

XY860807 柱式无内毒素质粒DNAOUT 50次

XY880912 大提柱式质粒 DNAOUT 5次|10次

XY881107 大提无内毒素质粒DNAOUT 5次|10次

XY880916 96孔板质粒DNAOUT(离心法 ) 1次

XY870903 一步法质粒 DNAOUT 2.0 50次|100次