pTRE-Tight载体如何构建：

质粒载体 即，在由限制性核酸内切酶修饰过的质粒DNA序列中插入外源的目的基因，以质粒为载体，将目的基因通过转化或转导的方法导进宿主细胞，进行重组、筛选、扩增的过程。

包括三部分：遗传标记基因，复制区，目的基因。

pTRE-Tight图谱：

1，该质粒的用途：筛选，扩增，表达，还是报告？用一种低拷贝数的质粒来扩增目的片段显然不如高拷贝的质粒效率高；

2，pTRE-Tight的宿主：原核质粒？酵母质粒？真核细胞质粒？

3，使用有无特殊要求：抗性，营养缺陷？

4，关键是研究：多克隆位点，上下游的限制酶位点是否合适，对于你要插入的目的片段，是否有高效、经济的酶切位点；启动子是什么诱导机制？起始密码子和终止子的位置？如果插入你的目的片段，是否会移码或提前终止？

5，如果你选用的是比较冷僻的限制酶，pTRE-Tight在多克隆位点外是否有该酶的酶切位点；

1. 标签蛋白序列或报告基因序列在插入片段的上游还是下游？对后续实验有无影响？XY4201 蛋白酶K 100mg

XY3301 2 x SYBR Green qPCR Mix (Sybr green荧光染料法定量PCR) 50次×50μl/200次×50μl

XY3901 2 x Real Time PCR Mix (Probe荧光探针法定量PCR) 40次×50μl/200次×50μl

XY3601 TUREscript SYBR Green qRT-PCR Kit (两步法荧光定量反转录PCR试剂盒) 25次×50μl/50次×50μl

XY4601 THERMOscript SYBR Green qRT-PCR Kit(两步法荧光定量耐热反转录PCR试剂盒) 25次×50μl/50次×50μl

XY4101 TUREscript One Step qRT-PCR Kit (一步法荧光定量反转录PCR试剂盒) 50次×50μl/100次×50μl

XY4201 THERMOscript One Step qRT-PCR Kit(一步法荧光定量耐热反转录PCR试剂盒) 50次×50μl/100次×50μl

XY3501 快速植物DNA提取扩增套装 50次/100次/200次

XY1701 TUREscript H Minus M-MuLV Reverse Transcriptase(反转录酶) 5000U/10000U/10000U×5

XY4301 THERMOscript H Minus M-MuLV RTase(耐热反转录酶) 5000U/10000U

XY1801 TUREscript 1st Strand cDNA (第一链反转录试剂盒) 25次/50次

XY4401 THERMOscript 1st Strand cDNA Synthesis Kit(第一链耐热反转录试剂盒) 25次/50次

XY3401 TUREscript One Step RT-PCR Kit(一步法反转录PCR试剂盒) 50次×50μl/100次×50μl

XY4501 THERMOscript One Step RT-PCR Kit(一步法耐热反转录PCR试剂盒) 50次×50μl/100次×50μl

XY4801 miRNA cDNA 第一链合成试剂盒 25次

XY4901 miRNA 荧光定量PCR检测试剂盒 50次×50μl

XY2001 长片段PCR扩增试剂盒 100次/500次

XY2101 高保真PCR扩增试剂盒 100次/500次

XY0101 pSURE-T 载体连接试剂盒 20次/60次/20次(带T4ligase)/60次(带T4ligase)

XY0201 pSURE -T Simple 载体连接试剂盒 20次/60次/20次(带T4ligase)/60次(带T4ligase)

XY0301 pGEMX -T Easy 载体连接试剂盒 20次/60次/20次(带T4ligase)/60次(带T4ligase)

XY0401 pBLUE-T 载体连接试剂盒 20次/60次/20次(带T4ligase)/60次(带T4ligase)

XY0501 通用T载体菌落PCR鉴定试剂盒 80次-100次/400次-500次