人淋巴内皮细胞cDNA 英文名称: HLEC cDNA |
型号:null 产品货号: 2504 |
价格:请致电:010-57128832,18610462672 |
品牌: 美国sciencell |
V28 pCD-6FLAGtag质粒选择主要考虑下述3点:
1、构建DNA 重组体的目的,克隆扩增/表达表达,选择合适的克隆载体/表达载体。
2、载体的类型: (1)克隆载体的克隆能力-据克隆片段大小(大选大,小选小)。如小athFont">2)表达载体据受体细胞类型-原核/真核/穿梭,E.coli/哺乳类细胞表达载体。 (3)对原核表达载体应该注意3点。
3、YCF4质粒 MCS 中的酶切位点数与组成方向因载体不同而异,适应目的基因与载体易于链接,不产生阅读框架错位。选用质粒(最常用)做载体的4点要求: ①选分子量小的质粒,即小载体(1-1.5kb)→不易损坏,在细菌里面拷贝数也多(也有大载体); ②一般使用松弛型质粒在细菌里扩增不受约束,一般10个以上的拷贝,而严谨型质粒小于10个。 ③必需具备一个以上的酶切位点,有选择的余地; ④必需有易检测的标记,多是抗生素的抗性基因,不特指多位Ampr(试一试)。 无论选用哪种载体,首先都要获得载体分子,YCF4质粒然后采用适当的限制酶将载体DNA 进行切 割,获得分子,以便于与目的基因片段进行连接。
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