rTEV蛋白酶使用说明书货号:P2060规格:1000U(200uL)
产品简介:rTEV蛋白酶(重组型)是经过基因工程改造后的重组蛋白酶,该酶特异性识Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe- Gln-Gly七氨基酸序列。rTEV蛋白酶与肠激酶U(EK)、Thrombin、FactorXa、SUMO等蛋白酶相比,具有高活性、高特异性的双重特点,rTEV蛋白酶因具高剪切活性和特异性,已成为融合蛋白表达后去除融合tag的首选蛋白酶。该酶经6×His标签纯化而得(含组胺酸标签),纯度达99%,剪切反应完毕后可通过His标签纯化树脂Ni-NTA Resin(Cat.No. P2010)去除。产品内容:试剂名称 rTEV蛋白酶规格 rTEV蛋白酶保存温度 rTEV蛋白酶(5U/uL) 200uL -80℃250×rTEV Protease Buffer 1mL -20℃说明书 1份保存rTEV蛋白酶条件:rTEV蛋白酶-80℃长期保存,可存储2年;首次使用后可置于-20℃保存,可储存6个月,避免反复冻融。250×rTEV Protease Buffer可置于-20℃保存。酶活定义:在1×rTEV Protease Buffer中,30℃反应1h,剪切>85%的3ug底物所需要的酶量定义为一个活性单位。使用方法说明:1.推荐使用溶液:50 mM NaH2PO4, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM DTT, 10%甘油,pH 8.0 buffer中进行剪切。2.250×rTEV Protease Buffer:250mM EDTA, 250 mM DTT, PH 8.03.rTEV蛋白酶与需要酶切的目的蛋白比例:1:1004.酶切体系: 融合蛋白1000 ug 250×rTEV Protease Buffer 4uL rTEV蛋白酶2uL 定容至1000uL 定容缓冲液:50 mM NaH2PO4, 150mM NaCl5.酶切条件:在16℃酶切6hr。用户可以根据自己研究的目的蛋白进行摸索酶切条件,可适当加大酶量或延长酶切时间。6.可取少量样本进行SDS-PAGE分析,若要去除酶切后体系中的rTEV蛋白酶,可用His标签纯化树脂亲和层析。