英文名称： Homocysteine Kit （Enzymatic cycling assay）
同型半胱氨酸检测试剂盒(酶法)说明书
Homocysteine (HCY)
【产品名称】
通用名：同型半胱氨酸测定试剂盒（循环酶法）
英文名：Homocysteine Kit （Enzymatic cycling assay）
【包装规格】
R1：48mL×1， R2:13mL×1
R1：48mL×2， R2:13mL×2
R1：60mL×4， R2:65mL×1
【预期用途】
本试剂用于体外定量测定人血清中同型半胱氨酸的含量。
临床适应症背景情况：同型半胱氨酸（Hcy）主要作为心血管疾病，尤其是冠状动脉粥硬化和心肌梗死的危险指标，它的含量升高程度与疾病的危险性成正比，是诱发心血管疾病的一个独立危险因素。
【检验原理】
氧化型HCY被转化成游离HCY，游离HCY在CBS催化下和丝氨酸反应生成L-胱硫***。L-胱硫***在CBL催化下又生成HCY、丙***酸和NH3。该循环反应生成的丙***酸可以用乳酸脱氢酶LDH和NADH检测到，NADH转变成NAD的速率与样品中HCY含量成正比。
CBS
丝氨酸 + 同型半胱氨酸 ———→ L-胱硫mi
CBL
L-胱硫mi———→同型半胱氨酸 ＋ 丙***酸 + NH3
LDH
丙***酸 + NADH+ ———→ 乳酸 ＋ NAD +
340nm处测定NADH+ 降低速率可以测得同型半胱氨酸的含量
【主要组成成分】
|
| 成 分 | 含 量 |
| 试剂R1 | NADH | 0.5 mmol/l |
| 丝氨酸（SER） | 0.8 mmol/L | |
| 还原剂 | 2 mmol/L | |
| 试剂R2 | 胱硫miβ-合成酶（CBS） | >20 KU/L |
| 胱硫miβ-分解酶（CBL） | >5 KU/L | |
| 乳酸脱氢酶 （LD） | >50 KU/L | |
| 稳定剂 | 0.5g/L |
【储存条件及有效期】
原包装试剂在2-8℃可稳定12个月，开瓶后在2-8℃可稳定30天。
【适用仪器】
本试剂盒适用于日立7060、奥林帕斯2700、贝克曼LX20、拜耳1800、罗氏P800全自动生化分析仪。
【样本要求】
1. 新鲜血清（无抗凝剂或干扰素等），采血后应及时分离，避免溶血。
2. 血清、血浆可在室温稳定4天，2-8ºC稳定几周，-20ºC稳定数月或几年。
3. 注意：不可使用含有氟化钠的血清或血浆。
4. 溶血，混浊，严重血脂样本不适宜做Hcy检测。
5. 采血前，请尽量避免高蛋白饮食，高蛋白饮食可能导致Hcy升高。
6. 血清样本检测结果常比抗凝血浆检测结果高5-10％。
【检验方法】
循环酶法
测定条件:速率法 主波长：340nm 副波长：700nm
操作步骤
| 标本 | 13μl |
| 试剂1 | 240μl |
| 混匀，置37℃孵育1～5分钟 | |
| 试剂3 | 65μl |
| 混匀，37℃孵育2分钟后，连续监测1-2 分钟，计算ΔA/min | |
全自动生化分析仪自身自带的程序参数输入法，上述的基本参数需结合此全自动生化分析仪自有的程序参数输入法，进行上机参数输入后试剂才能配套仪器自动测定。
质量控制程序
选用与校准品对应的质控品，质控测定值应在规定的范围内。如果结果偏离范围，请按以下步骤查找原因：
1. 检查参数设置和光源是否正确。
2．检查比色杯和吸样针是否洁净。
3．检查水是否被污染，细菌增长会导致不正确的结果。
4. 检查反应温度。
5．检查试剂盒的效期。
计算 △A测定
Hcy浓度（μmol/L）= HCY标准浓度 × —————
△A标准
【参考值（参考范围）】
血清:3-15μmol /L
建议各实验室建立自己的参考值范围。
【检验结果的解释】
临床诊断应综合考虑临床资料和实验室数据，而不应根据一次测定的结果来做出。
当同型半胱氨酸的含量超过50.0μmol /L时，标本需经稀释后重新确认。
【检验方法的局限性】
1.严重黄疸、溶血及乳糜样血清应先制备无蛋白血滤液，然后再进行测定。
2.溶血、混浊、严重脂浊样本不适宜做HCY检测。
【产品性能指标】
1.线性范围：0.5～50.0μmol /L，判定依据：r≥0.990。
2.准确度：测定定值质控血清，三次测定的平均值应在规定的靶值±15%范围内；
3.精密度：批内CV≤5.0%;批间相对极差≤8.0%。
4. 试剂空白吸光度：波长340nm，光径10mm，温度37℃，测得试剂吸光度值A≥0.8。
5. 分析灵敏度：重复测定浓度为零的样品20次，
+2SD≤0.5μmol/L
【注意事项】
1.仅供体外诊断使用，试剂含有防腐剂若不慎溅到人体表面如皮肤、眼睛等，必须用清水冲洗，如果误食则需要到医院治疗。
2.如仪器内无本试剂盒所要求波长的滤光片，选择波长接近的滤片。
3、采血前，请尽量避免高蛋白饮食，高蛋白饮食可能导致同型半胱氨酸升高。
4、试剂变混浊或者空白吸光度值＜0.8，将不能使用，应弃去。
5、SAH会引起严重的正干扰。然而，正常人体血浆中含有检测不到的SAH或低于1nmol/L含量的SAH，不会引起干扰。检测中，应避免污染SAH。
6、红细胞中的3-偶氮腺苷会抑制反应体系中的关键酶，从而抑制HCY的生成。本品不能使用含有3-偶氮腺苷的标本。
7、使用下列药物治疗的病人，会引起HCY检测水平偏高：氨甲蝶呤、卡马西平、***妥英、NO、6-氮尿嘧***苷等。
8、试剂反应后所产生的废液及使用后难降解的包装材料应集中收集后交当地环境废物处理站处理。
【参考文献】
1.Refsum H, Smith AD, Ueland PM, Nexo E et al. Facts and recommendations about Total Homocysteine Determinations: an Expert Opinion. Clin Chem 2004;50:3-32.
【生产企业】
北京爱必信生物技术有限公司
生产地址：北京亦庄经济开发区科创6街88号3号楼
邮编: 101111
电话: 010-56315110
传真: 010-56315107