该试剂盒包括了用于核酸扩增的全部试剂:实时PCR Master Mix,特异性的引物和探针,同时还配有质控对照(β球蛋白基因)和标准品。本检测基于对病人标本进行实时PCR三个平行反应:
反应1:用两种不同的荧光检测HPV 16, 18 和45 的存在及进行定量分析。
反应2:用两种不同的荧光检测HPV 31, 33,52,58 和67 的存在及进行定量分析。
反应3:检测β-球蛋白基因来评定所获取的标本或所提取的DNA是否合格,如果在β-球蛋白基因的扩增中呈阴性,则表明所获取的标本不足,所提取的DNA的量不够或标本中含有影响的抑制物。对每份标本中的脱落细胞进行定量分析,从而可对HPV进行绝对定量计算。
该试剂盒式国际上首次并唯一基于多通道实时荧光PCR定量分析仪来进行检测的,该试剂盒的出现是对HPV(宫颈癌早期DNA检测筛查)项目的重大贡献,相对于以往出现的多种HPV检测方法,它的明确意义在于:
解决了细胞学检查受取材方法,图片制作,染色技巧及细胞学专家阅片水平的影响所产生的准确度低,结果不能重复等缺陷;
解决了传统PCR技术的灵敏度低,特异性不强,检测值缺乏临床依据,实验无法实现自动化并获取客观结果等问题;
解决了单色荧光PCR试剂只能检测HPV单一或少数类型的问题;
解决了多型HPV病毒检测的难题;
解决了杂交捕获法不能进行基因分型以及交叉污染难以克服的问题。
该试剂盒是来自欧洲权威分子生物学研究中心的新产品,独有的技术拥有国际专利,是真正的宫颈癌早期筛查试剂,其技术的主要特点可概括为:
高特异性:该试剂盒根据每个不同的HPV基因型从大量的HPV基因中筛选出独特序列而设计的特异性引物和探针,这些特异性引物和探针与不同基因组DNA或其它病原性微生物核酸无交叉反应,可一次性精确筛查占99% 的致癌性高危性HPV, 带针式内标。
高灵敏度:每个HPV基因型的最低检查拷贝数为:≥103,对CIN II, CIN III 及宫颈癌的检出率大于98%,并可根据临床需要确定阈值。
重复性好:同一标本用同一批合格试剂进行检测,起始拷贝数的偏差不好过10。
[RQ-HPV HR 试剂的特点]
1.目前唯一符合世界组织(WHO-2006.2)检测致宫颈癌所有HPV 型的分型,定性,及携带B-球蛋白基因的最新国际标准上市试剂。
2.一次PCR可检测所有致癌基因类型,同时即可对最主要类型确定基因分型。
4.以β-球蛋白基因作为内对照对检测样本进行绝对定量分析,通过β-球蛋白基因同时可监测每次取样量是否符合检测要求。
5.快速:从DNA 提取到荧光定量PCR 的检测,全过程仅需三小时左右,检测不受标本量的限制。
8.配备有国际标准性内标,可对每一份标本进行独立的实验质控,保证了每一实验结果的可靠性及独立性。
9.无须购买专用仪器,适用于多种实时PCR 仪。该试剂盒是目前国内唯一可对HPV进行分型定量的荧光定量PCR分析试剂盒,且操作简便。

