试剂盒组成成分
1、 线性化的三合一质粒：质粒含CMV启动子驱动的人源化Cas9表达元件、人U6启动子驱动
客户特异sgRNA表达（待重组）的表达元件以及如下的选择性基因表达元件：
药物抗性基因表达元件：
SV40 启动子驱动的Neomycin 抗性基因表达元件
 EF1a 启动子驱动的 Puromycin 抗性基因表达元件
或
EF1a 启动子驱动的荧光报告基因表达元件：
eGFP （绿色荧光蛋白）
mCherry （红色荧光蛋白）
eCFP （青色荧光蛋白）
eYFP （黄色荧光蛋白）
2、正对照引物：F-Oligo（100uM，序列：CACCAGCTTCATTGAACTGCTCTT） ；R-Oligo
（100uM，序列：AAACAAGAGCAGTTCAATGAAGCT）
3、TE buffer （引物退火缓冲液）
4、T4 连接酶
5、T4 Buffer（T4连接缓冲液）
6、正向引物F-test（用于验证客户gRNA重组后获得的质粒）
7、MQ（超纯水）
8、DH5 （感受态大肠杆菌）
客户自备：用于PCR反应的试剂（包括Taq酶等）