Thermo Scientific Phusion高保真DNA聚合酶
型号:null    产品货号: F-530S /F-530L/F-531S /F-531L/F-532S /F-532L/
价格:请致电:010-57128832,18610462672
品牌: 芬兰

    自2003年问世以来,Phusion®高保真DNA聚合酶为高保真的PCR反应建立了新的标准。Phusion DNA聚合酶已被证明是许多高要求PCR应用的最佳选择,例如史上第一个功能性基因组的合成。

    Phusion高保真DNA聚合酶中,一个DNA结合域被融合到类热球菌(Pyrococcus)具有校对功能的聚合酶上。由于这项独特的融合技术,Phusion DNA聚合酶合成DNA的速度和准确度使以往任何单一酶都难以企及,即使是最复杂的模板,也能准确、快速地完成反应。此外,Phusion DNA聚合酶能够最大限度地容忍各种PCR抑制剂,因此只需要很少的优化步骤就可以进行非常高效的扩增。对于热启动PCR,具有高度特异性和极强聚合能力的Phusion热启动II高保真DNA聚合酶是理想的选择。

    Phusion DNA聚合酶的处理能力*是Pfu的10倍,Taq的2倍。这大大降低了延伸时间,提高了扩增的能力,使其能够在更短的时间里扩增更长的DN**段(长达20kb)。与传统校正酶相比,Phusion DNA聚合酶用量更少,产量更高。

 

优点:
■ 精确:是目前市场上保真度最高的热稳定性聚合酶
■ 强劲:更高的成功率和更少的优化步骤
■ 快速:高处理能力缩短反应时间(延伸速度15-30s/kb)
■ 高产:低酶量、高产量(50微升反应体系只需0.5-1单位酶)
■ 特异:独特的热启动修饰,实现“零时间”激活,减少了非特异性扩增和引物降解

 

应用:
■ 高保真PCR
■ 快速PCR
■ 热启动PCR
■ 长片段扩增(长达20kb)
■ 高通量PCR

 

满足高要求PCR需求的超高保真度

       Phusion DNA聚合酶的错配率极低,为高保真PCR建立了新标准。使用改良的lacI方法检测,Phusion DNA聚合酶的错配率比Taq DNA聚合酶低约50倍, 比Pfu DNA聚合酶低6倍(见下图)。



 

反应失败率最低

        Phusion DNA聚合酶能够最大限度地容忍各种抑制剂和其它复杂的反应条件。这不但保证把反应的失败率降到最低,而且能够利用非纯化的材料直接进行PCR。在为人源样本和血液样本设计的Thermo Scientific直接PCR试剂盒中,Phusion DNA聚合酶是主要成分。


 

以多种未经DNA提纯的人源样本为模板进行直接PCR(图1)
不同的样品直接置于20μl PCR反应体系中。利用Phusion人源样本直接PCR试剂盒含有的对照引物成功扩增一段237bp的DNA。PCR反应使用的是Thermo Scientific UTW反应管和Piko热循环仪。


 

Phusion DNA 聚合酶集超高保真度、快速和强劲的性能于一体(图2)
从Thermus sp.基因组文库中随机挑选16个克隆进行扩增。结果显示了Phusion DNA聚合酶的强劲性能和快速。在用Phusion DNA聚合酶扩增时,94%的DN**段被成功扩增,酶的用量更少,产量也更高。Pfu DNA聚合酶的成功率只有56%,Tap DNA聚合酶为62%,而且产量明显较少。

 

高保真快速PCR

        与其他酶相比,Phusion DNA聚合酶在每次与DNA的结合反应中都能够掺入更多的核苷酸。其高处理能力大大缩短了延伸步骤的时间,进而加快了整个反应的进行。使用Phusion Flash High-Fidelity PCR Master Mix(Phusion 快速高保真PCR Master Mix)的反应时间最短,此试剂盒是专门针对快速PCR而研发的产品。由于其结构独特,Phusion DNA聚合酶的效率非常高。在任何PCR反应中,该酶的用量显著低于其他常见的聚合酶。Phusion DNA聚合酶的高速度和高效率使得它能在最短时间内获得大量产物。




 

用更少的酶 —— 获得更多的产物(图3)
使用3种不同的DNA聚合酶扩增一个长为3.8kb的人β球蛋白基因。使用Phusion DNA聚合酶可成功扩增出此3.8kb的基因组片段,退火和延长步骤仅需1分钟,明显快于其他两种聚合酶。一个单位的Phusion DNA聚合酶所获得的产物高于2.5或5个单位的Pfu DNA聚合酶的产量。


 

既快速又高产的Phusion Flash(图4)
在Piko热循环仪上,三种不同的聚合酶用不同的延伸时间(10-60s)扩增一段1.5kb的人类cathepsin K基因。只有Phusion Flash能够使用10秒和20秒这样极短的延伸时间完成实验。与其他测试的酶相比,它的特异性产物的产量也非常高。

几种高性能酶对比:

对比项目Phusion高保真DNA聚合酶Phusion热启动II高保真DNA聚合酶Phusion Flash高保真DNA聚合酶Phire热启动IIDNA聚合酶
特点平端或3’A端平端平端平端平端
目标片段长度≤ 20 kb ≤ 20 kb ≤ 20 kb ≤ 7.5 kb
热启动
推荐延伸时间 15-30 s/kb 15-30 s/kb 15 s/kb 10-15 s/kb
校正功能一般
保真度 vs. Taq 52x 52x 25x 2x
形式单酶 1-
Master mix 2--
试剂盒 3---

1. 单酶: DNA聚合酶,缓冲液,DMSO和MgCl2
2. Master Mix:2X master mix
3. 试剂盒:所有必需的PCR反应成分包括对照模板和引物

 

订购信息:

货号产品名称规格价格
F-530S Phusion高保真DNA聚合酶100 U ¥879
F-530LPhusion高保真DNA聚合酶500 U¥3,517
F-531S  Phusion高保真PCR Master Mix及HF Buffer100 x 50μl rxns¥1,426
F-531LPhusion高保真PCR Master Mix及HF Buffer500 x 50μl rxns¥5,703
F-532S   Phusion高保真PCR Master Mix及GC Buffer100 x 50μl rxns¥1,426
F-532LPhusion高保真PCR Master Mix及GC Buffer500 x 50μl rxns¥5,703
F-548S  Phusion Flash高保真PCR Master Mix100 x 20μl rxns ¥666
F-548LPhusion Flash高保真PCR Master Mix500 x 20μl rxns¥2,664
F-553S   Phusion高保真PCR试剂盒125 x 20μl rxns¥555
F-553LPhusion高保真PCR试剂盒500 x 20μl rxns¥1,878