Thermo Fisher Scientific Phusion® 热启动II高保真DNA聚合酶对于各种PCR应用都表现出卓越的性能。其所具有的独特的结构域赋予这种类热球菌高保真酶无可匹敌的扩增能力、准确性和合成速率。使用改良的lacI方法检测,在HF缓冲液中,Phusion 热启动II高保真DNA聚合酶的错配率与Phusion DNA聚合酶的一致,为4.4x10-7。这个数值比Thermus aquaticus DNA聚合酶大约低50倍,比Pyrococcus furiosus DNA聚合酶低6倍。此外,该酶亦能高效地扩增长片段,在我们对该酶的质控检测实验中使用的即是7.5kb的人类基因组片段和20kb的λDN**段。
Phusion 热启动II高保真DNA聚合酶是DNA聚合酶和一个具可逆结合性能的,特异的Affibody蛋白的融合体,Affibody蛋白在常温下可抑制DNA聚合酶的活性,从而可有效阻止该酶非特异性的扩增。此外,Affibody配基可抑制该酶3’→5’外切酶的活性,因此阻止了建立反应体系时对引物和模板DNA的降解。在聚合温度,Affibody分子被释放,聚合酶充分活化。在PCR实验过程中,Phusion热启动II高保真DNA聚合酶不需要额外的激活步骤。
热启动修饰带来的超高特异性

Phusion热启动II DNA聚合酶既具有极高特异性,又可获得高产量(图1)
将来自五个厂家的、具有校对功能的DNA聚合酶分别用于扩增人类基因组1.7-2.3kb的片段。Phusion热启动II DNA聚合酶能够获得高产量的特定产物,而其他酶的扩增产量很低或者无法扩增,某些酶还有非特异性产物的产生。
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变,并与环形质粒模板退火。Phusion高保真DNA聚合酶以质粒为模板进行扩增。而后携带突变的质粒经过5分钟的连接环化,转化到菌株中。
几种高性能酶对比:
对比项目 | Phusion高保真DNA聚合酶 | Phusion热启动II高保真DNA聚合酶 | Phusion Flash高保真DNA聚合酶 | Phire热启动IIDNA聚合酶 |
特点 | 平端或3’A端 | 平端 | 平端 | 平端 | 平端 |
目标片段长度 | ≤ 20 kb | ≤ 20 kb | ≤ 20 kb | ≤ 7.5 kb |
热启动 | 否 | 是 | 是 | 是 |
推荐延伸时间 | 15-30 s/kb | 15-30 s/kb | 15 s/kb | 10-15 s/kb |
校正功能 | 是 | 是 | 是 | 一般 |
保真度 vs. Taq | 52x | 52x | 25x | 2x |
形式 | 单酶 1 | √ | √ | - | √ |
Master mix 2 | √ | - | √ | - |
试剂盒 3 | √ | - | - | - |
1. 单酶: DNA聚合酶,缓冲液,DMSO和MgCl2
2. Master Mix:2X master mix
3. 试剂盒:所有必需的PCR反应成分包括对照模板和引物
订购信息:
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
F-549S | Phusion热启动II高保真DNA Polymerase | 100 U | ¥1,067 |
F-549L | Phusion热启动II高保真DNA Polymerase | 500 U | ¥4,269 |
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F-546L | Phusion RT-PCR试剂盒 | 100 rxns | ¥3,244 |
F-541 | Phusion定点突变试剂盒 | 20 rxns,含有 10个对照反应 | ¥1,195 |
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