E. coli S30 Extract System for Circular DNA

L1020的产品组分
3 x150ul                S30 Extract, Circular
1 x1ml                     Luciferase Dilution Reagent
1 x10ug                 pBESTluc™ DNA, Circular (Control)
1 x250ul                Luciferase Assay Reagent
1 x750ul               S30 Premix without Amino Acids
1 x175ul               Amino Acid Mixture Minus Methionine
1 x175ul               Amino Acid Mixture Minus Cysteine
1 x175ul               Amino Acid Mixture Minus Leucine

E. coli S30 Extract for Circular DNA(a,b) (用于环状DNA模板的E. coli S30提取系统)简化了在质粒或λ载体中克隆的DNA序列的转录和翻译，提供了鉴定和研究多肽特征的有力工具。研究者只需准备含有合适的原核启动子和核糖体结合位点的克隆DNA即可。该产品对Zubay发表的方法(1,2)进行了改良，这种提取物是从缺陷OmpT内蛋白酶和lon蛋白酶活性的大肠杆菌B株制得。从而极大地增强了表达蛋白的稳定性，因为若在体内翻译的话，表达的目标蛋白将会被蛋白酶降解(3,4)。由于宿主编码的抑制物的存在，某些蛋白在体内表达的水平很低，使用S30体外系统可提高这些蛋白的翻译水平(5)。

特点
  • 更好的稳定性：降低了表达蛋白被降解的机会。
  • 完全：包含了偶联的转录/翻译反应需要的所有组分。
  • 低背景：系统合成的内源蛋白质水平极低。
  • 经过优化：每批S30提取物的预混合物已经经过优化，包括所有其它必需组分(氨基酸除外)，如核糖体，各种tRNAs，PEP(***酸***酸)和盐类。
  • 可定制或批量订购：请访问www.promega.com/myway/，了解该产品的更多定制信息。

用途
  • 原核基因表达调控。
  • 鉴定克隆DNA基因表达的产物或多肽图谱来确定DNA片段。
  • 快速筛选构建在载体上的真核或原核DNA克隆的翻译，获得可 在大肠杆菌中高效表达的克隆载体。
  • 筛选抑制细菌翻译的化合物。

操作手册       Technical Bulletin TB092

储存条件：储存于-70℃。

参考文献
1. Zubay, G. (1973) Ann. Rev. Genet. 7, 267–87.
2. Zubay, G. (1980) Meth. Enzymol. 65, 856–77.
3. Pratt, J.M. (1984) In: Transcription and Translation, Hames, B.D. and
Higgens S.J., eds., IRL Press, Oxford, 179.
4. Studier, F.W. and Moffatt, B.A. (1986) J. Mol. Biol. 189, 113–30.
5. Collins, J. (1979) Gene 6, 29–42.

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