| 血凝块基因组DNA提取试剂盒 英文名称： Clotted Blood Genomic DNA Kit | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 型号:null 产品货号： HS0302B | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 价格:请致电：010-57128832,18610462672 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 品牌: 北京厚生博泰生物技术有限公司 试剂级别： 分子生物学级 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
血凝块基因组DNA提取试剂盒 Clotted Blood Genomic DNA Kit
本产品适用于未加抗凝剂的血凝块！并需要手工研磨样品。
产品包装
自备试剂 无水乙醇、RNase A（可选）
储存条件 蛋白酶K于-20℃，其他组分室温（15 ~ 25℃）
注意事项 1. 如缓冲液GA和缓冲液GB产生沉淀，可在 2. 样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段小，提取量下降； 3. 所有离心步骤均为台式离心机，室温下操作。
操作步骤 1. 试剂盒自带的10×RBL为现用现配品，使用时需要用蒸馏水将其稀释成1×RBL。 2. 取100mg血块，加入到1.5ml离心管中。 （注意：血块不要超过100mg，太多会使离心柱的膜堵塞，提取的基因组DNA的量减少，纯度降低） 3. 加入400ul的 1×RBL，倒入匀浆器匀浆，匀浆后收集到离心管中，再加100ul稍微洗下匀浆器上残留的液体，一起收集到离心管中。 4. 用吸液器充分吹打，使匀浆液分散，室温下静止10分钟，10000rpm离心1分钟，弃掉上清，再加500ul的 1×RBL，用吸液器充分吹打，使匀浆液分散，室温下静止10分钟，10000rpm离心1分钟，弃掉上清。 5. 加入500 ul的Buffer GA，用枪头充分吹打或用涡旋振荡器充分悬浮。 （注意：如要去除RNA，可加入浓度为100 mg/ml的RNase A 4 ul，室温处理5分钟） 6. 加入20 ul的Proteinase K溶液，充分混匀， 7. 加入200 ul的Buffer GB，充分混匀， （注意：缓冲液Buffer GB加入时可能会产生白色沉淀，一般56℃时会消失，不影响后续实验，如溶液未变清亮，说明裂解不彻底，可能导致提取的DNA量少或者提取的DNA不纯） 8. 加入350 ul无水乙醇，充分震荡，此时可能会出现絮状沉淀，短暂离心以去除管盖内壁水珠。 9. 将一个Spin Columns CG放入Collection Tubes中，将上一步所得溶液和絮状沉淀转移到离心吸附柱中，12 000 rpm离心30 秒，弃收集管中的废液。 10. 向吸附柱内加入500 ul的Buffer GD，室温12 000 rpm离心30 秒，弃收集管中废液。 （注意：Buffer GD中含有乙醇，用后及时盖紧，以防乙醇挥发） 11. 向吸附柱内加入600 ul的漂洗液Buffer PW，室温12 000 rpm离心30 秒，弃收集管中废液。 （注意：Buffer GD中含有乙醇，用后及时盖紧，以防乙醇挥发） 12. 重复步骤10一次。（可省略） 13. 室温12 000 rpm离心2 分钟，甩干残留液体。 （注意：此步不能省略，否则残留乙醇会影响质粒的后续使用） 14. 将离心吸附柱置于一个新的1.5 ml塑料离心管（自备）中，加入50 ~ 200 ul的洗脱液，室温放置2 ~ 5 分钟。12 000 rpm离心1 分钟，离心管底溶液即质粒DNA。 （注意：为增加洗脱效率，可将洗脱液在50 ~ 60℃预热。如需使用去离子水洗脱，可用NaOH调整其pH值在7.0 ~ 8.5之间，为了增加质粒回收率，可将得到的溶液重新加入到离心管中，室温放置2 分钟，再次离心收集）
销 售：张道军 手 机：18010069130 电 话： 010-62734646, 400-0488048 传 真：010- 62734949, 邮 箱：2937552420@qq.com |