加A试剂盒
英文名称: A-Tailing Kit
型号:null    产品货号: HS0511
价格:请致电:010-57128832,18610462672
品牌: 北京厚生博泰生物技术有限公司
试剂级别: 分子生物学级

A试剂盒

A-Tailing Kit

(目录号HS0511

产品包装

试剂盒成分

20

Taq DNA Polymerase (5 U/ul)

20 ul

2 × Tailing Buffer

500 ul

ddH2O

1 ml

保存条件

-20保存,避免反复冻融。

产品简介

利用具有3-5外切酶活性的高保真DNA聚合酶,如Pfu等进行PCR扩增时,其PCR产物为不带A尾的平末端DNA片段,如想将该片段克隆到T载体上,需要先利用Taq DNA polymerase在平末端片段后加上A尾后才能与T载体上3末端的T碱基互补连接。本试剂盒提供了加A尾需要的所有成分,可以在 20 min左右完成整个过程。与平末端DNA片段克隆相比,TA克隆具有较高的克隆效率,可提高试验成功率。

产品特点

1. 简单,2 × Tailing Buffer含有所需要的所有成分,不需单独准备。

2. 适用于任何平末端的DNA片段,包括Pfu等高保真酶PCR扩增的产物。

操作步骤

1. 将平末端 PCR 产物进行纯化,若 PCR 无非特异扩增可用 DNA 产物回收试剂盒进行纯化,若 PCR 产物有非特异性扩增可用胶回收纯化试剂盒进行纯化。

2. 将以上纯化好的平末端DNA 片段按以下反应体系加A 尾:

 

10 ul体系

平末端DNA片段

X ul(<1 ug)

2 × Tailing Buffer

5 ul

Taq DNA Polymerase (5 U/ul)

1 ul

ddH2O

补足到10 ul

3. 轻轻混匀后72保温20 ~ 30 min

4. A尾的产物可以不需要再次纯化直接用于连接反应。

 免费领取试用装,

联系人:张道军,

电话:18010069130