TaqMan Mixture(With ROX)

(目录号HS0615)

产品包装

保存条件

-20℃避光保存。

产品简介

     GoldStar TaqMan Mixture（With ROX）是专用于探针法（Taq-Man，Molecular Beacon等）实时荧光定量PCR的预混体系，包含GoldStar Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、Mg²⁺和ROX校正染料，操作简单方便。本品含有的GoldStar Taq DNA Poly-merase是一种全新高效、经化学修饰的热启动酶，在常温下没有聚合酶活性，有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合而造成的非特异性扩增，酶的激活需在95℃下孵育10分钟。独特的PCR缓冲体系与热启动酶的组合，有效抑制非特异性的PCR扩增，显著提高PCR的扩增效率。该产品灵敏度高，可以检测单拷贝的模板。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后cDNA靶序列检测，如基因表达分析，拷贝数分析，SNP基因型分析等，适用于不同类型探针法荧光定量。所含的ROX染料可校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差, 适用于以ROX作为校正染料的所有荧光定量PCR仪。

产品特点

1. 高灵敏度：可以精确定量低拷贝模板。

2. 高特异性：最大限度的减少引物二聚体和非特异性产物。

3. 有效性：扩增效率高，CT值更低。 

产品应用

基因表达分析；拷贝数分析；SNP分析。

 

使用方法

以下举例为常规PCR 反应体系和反应程序，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1. PCR反应体系： 

 

注意

1）通常引物浓度以0.2uM可以得到较好结果，可以在0.1 ~ 1.0 μM作为设定范围的参考。

2）使用的探针浓度，与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关，实际使用时请参照仪器说明书，或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。

3）通常DNA模板的量以10 ~ 100ng基因组DNA或1 ~ 10ngcDNA为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定最佳的模板使用量。

2. PCR反应程序：

两步法PCR：

注意

1）本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10min条件下实现酶的活化。

2）建议采用两步法PCR反应程序，若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增，退火温度请以 56℃ ~ 64℃的范围作为设定参考。

 

 

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