克隆菌落快速鉴定试剂盒
Colony Fast PCR Kit
（目录号HS0512）
产品包装
  
   
试剂盒成分
   
50次
  
  
   
2 × Taq MasterMix
   
0.5 ml
  
  
   
Universal primer F (10 uM)
   
50 ul
  
  
   
Universal primer R (10 uM)
   
50 ul
  
  
   
ddH2O
   
1 ml
  
 
保存条件
-20℃保存2年。
产品简介
菌落PCR鉴定是鉴定T载体与目的片段连接后是否有阳性克隆 (含插入片段)最方便快捷的方法。本公司利用通用T载体引物研制的通用T载体菌落PCR鉴定试剂盒，可用于市面上所有常见的T载体(包括pGEM，pUC，pBluescript系列)阳性克隆的鉴定。此外，本试剂盒通用T载体引物在未插入片段时的距离大于150 bp，加上插入片段的长度，可以清晰地区分是插入片段扩增出的条带还是引物二聚体扩增出的条带，避免假阳性或者假阴性，大大提高了准确性。Taq MasterMix预混优化系统，无需您加入任何成分，直接加入需筛选单菌落，经过PCR反应和电泳检测即可得到重组菌落鉴定的结果。
产品特点
1. 方便快捷：省去了菌体培养和提取质粒的时间与费用，快速简便地鉴定重组子。 
2. 准确灵敏：鉴定的准确度达90%以上。
3. 通用性强：可以用于市面上的所有T-载体的鉴定。
注意事项
1．挑取单菌落进行重组菌落鉴定，请先做好标记，便于鉴定后使用。
2. 鉴定时挑取单菌落不要挑取过多菌体，以免影响PCR 结果。
3. 请根据插入片段大小设定 PCR 程序，本产品所提供的 Taq MasterMix 中所含的 Taq DNA 聚合酶的扩增效率为1 kb/30 s，即如插入片段大小为1 kb 时，延伸时间为30 sec。
操作步骤
1. 按以下体系配制反应液
  
   
2×Taq PCR MasterMix
   
10 ul
  
  
   
Universal primer F（10 uM）
   
1 ul
  
  
   
Universal primer R（10 uM）
   
1 ul
  
  
   
ddH2O
   
补足至20 μl
  
 
2． 将过夜培养的平板上的菌落编号后，使用灭菌的枪头或牙签挑取一部分单菌落加入上述反应液，吹打混匀使菌落充分分散到反应液中。
（注意：可多设置一管不加菌落的阴性对照，以便于分析实验结果。）
3. 将PCR管置于PCR仪上按以下条件开始反应，推荐条件如下：
  
   
步骤
   
 温度
   
时间
  
  
   
预变性
   
 94℃
   
5   min
  
  
   
变性
   
 94℃
   
30   s
   
25-30
   
个循环
  
  
   
退火
   
 55℃
   
30   s
  
  
   
延伸
   
 72℃
   
30   s
  
  
   
终延伸
   
 72℃
   
5   min
  
 
（注意：延伸时间根据所扩增片段大小设定，本产品的扩增速率为1kb/30 s）
4. 结果检测：本产品已加入染料（蓝色）；反应结束后取5 ~ 10 μl反应产物直接电泳检测结果，无需再使用上样缓冲液。
 免费领取试用装，
联系人：张道军，
电话：18010069130
网址：www.hsebio.com/html/pro/