英文名称： SuperScript® III Reverse Transcriptase
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SuperScript® III 反转录酶 (RT) (SuperScript® III Reverse Transcriptase (RT)) 是 SuperScript® II RT 的专有突变体，在 50°C 具有活性，半衰期为 220 分钟，使用基因特异性引物 (GSP) 提高特异性，在所有 RT 中 cDNA 产量最高。 如果要进行特定基因的 RT-PCR 或从总 RNA 或 poly (A)+ RNA 样品生成 cDNA，该产品十分理想。 和 SuperScript® II 一样，它可以从单链 RNA、DNA 或 RNA:DNA 杂合体合成互补 DNA链。 通过引入点突变对 SuperScript® III RT 进行遗传改造，这些点突变可以增加半衰期、降低 RNase 活性并增加热稳定性。 进行结构修饰后：
- 50°C 时半衰期为 220 分钟，获得最高的 cDNA 产量（图 1）
- RNase H 活性降低，获得更多全长 cDNA
- 在 50°C 有最大活性，用 GSP 增加特异性
- 能增加 RT 单位而不抑制后续的 PCR
应用： 第一链 cDNA 合成、阵列标记、cDNA 文库、RT-PCR、引物延伸和 3´ 和 5´ RACE。
来源： 纯化自表达 M-MLV 的 pol 基因的大肠杆菌 (1,2)，通过突变增加了热稳定性和半衰期，降低了RNase H 活性。
性能和质量测试： SDS-PAGE 纯度；脱氧核糖核酸内切酶、脱氧核糖核酸外切酶和核糖核酸酶分析（图 2）及 cDNA 产物的产量和长度。
单位定义： 一个单位的 SuperScript® III RT 是在 37°C 的反应体系中，使用 poly(A)•oligo(dT)12-18作为模板•引物，在 10 分钟内将 1 纳摩尔脱氧核糖核苷酸掺入酸沉淀材料所需的酶量 (3)。
单位反应条件： 50 mM Tris-HCl (pH 8.3)、40 mM KCl、6 mM MgCl 2、1 mM DTT。 0.5 mM [ 3 H]dTTP、0.1 mM poly(A)、0.1 mM oligo(dT)12-18、0.1 mg/ml BSA 和酶，共 50 µl，温度 37°C，时间 10分钟。
详细说明
常用规格
| Optimal Reaction Temperature: | 50° C |
| Final Product Size(s): | 12.3 kb or less |
| Ribonuclease H Activity: | Reduced |
| Concentration: | 200 units/µl |
| Form: | Frozen |
| Format: | Tube(s) |
| Template: | ssRNA |
| Sensitivity: | Medium |
| Product Size: | 10,000 units |
| Enzyme Function: | RNA dependent DNA Polymerase |
| Number of Reactions: | 50 Reactions |
| Regulatory Statement: | For Research Use Only. Not for any animal or human therapeutic or diagnostic use. |
内容和储存
SuperScript® III Reverse Transcriptase is supplied with a vial of 5X first-strand buffer [250 mM Tris-HCl (pH 8.3), 375 mM KCl, 15 mM MgCl2], and a vial of 100 mM DTT.
Store at -20°C. Guaranteed stable for 6 months when properly stored.
Store at -20°C. Guaranteed stable for 6 months when properly stored.