Lipo系列高效低毒细胞转染试剂(包教包会)
英文名称: Lipogene
型号:null    产品货号: 1
价格:请致电:010-57128832,18610462672
品牌: 上海

 Lipogene脂质体转染试剂(Lipogene  Transfection Reagent)是一款深受科研工作者喜爱及推崇的,适合于把质粒或其它形式的核酸包括DNA、RNA、寡核苷酸,以及核酸蛋白复合物转染到培养的真核细胞中的高效阳离子脂质体转染试剂。

汉恒独立研发的Lipogene 脂质体转染试剂具有转染效率高,重复性好,操作简单,无明显细胞毒性,抗血清干扰等优点,用Lipogene 转染细胞后,对于大多数细胞,72小时内不更换培养液无明显细胞毒性。使用Lipogene 转染时血清的存在不影响转染效率,这样可以减小去除血清对细胞的损伤。

Lipogene 转染试剂不仅适用于常规的质粒转染,也适用于siRNA转染。

Lipogene 对于贴壁细胞和悬浮细胞都适用,并且可以用于稳定表达细胞株的筛选。

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• 适用于高通量应用的可靠性能

• 建立稳定细胞系的最佳选择


适用于基因表达和基因沉默的高性能转染试剂

Lipofectamine® 2000试剂适合所有常见细胞系及许多难以转染的细胞系,可用于含有或不含血清的培养基。在基因沉默应用中,Lipofectamine® 2000试剂的高效转染提供了很高的基因敲除水平,足以获得令人信服的结果。Lipofectamine® 2000试剂可实现siRNA和质粒DNA的高效转染,它是共转染的首选试剂。Lipofectamine® 2000试剂使用方便 – 只需将其与核酸混合,加入细胞培养物即可。


适合高通量操作

Lipofectamine® 2000试剂使用简单、快速且具有很高的转染效率,适用于瞬时蛋白表达或高通量RNAi转染。在上述应用中,可轻松建立自动化或机器人系统转染条件。如需了解有关Lipofectamine® 2000的实验方案、文献引证及其它产品信息,可登录细胞系数据库

仅供研究使用。不得用于人或动物的治疗或诊断。

 

LIPOFECTAMINE 2000 转染试剂转染步骤

此实验步骤设计用来进项24孔板贴壁细胞的瞬时或稳定转染,其为设计用来在生长培养基中直接加入复合物。

1.转染前一天,胰酶消化细胞并技术,细胞铺板,使其在转染日密度为90%。细胞铺板在0.5ml含血清,不含抗生素的正常生长的培养基中。参见索莱宝公司制表6了解建议的细胞密度

2.对于每孔细胞,使用50ul无血清培养基(如:OPTI-MEMI培养基)稀释0.8ug-10.ugDNA.多空操作可以批量制备。

3.对于每孔细胞,使用50ulOPTI-MEMI培养基稀释1ul-3ul LIPOFECTAMINE2000试剂。LIPOFECTAMINE2000稀释后,在30分钟内同稀释的NDA混合。保温时间过长会降低活性。可以批量制备。注意:即使LIPOFECTAMINE2000使用OPTI-MEMI稀释,细胞也可以使用D-MEM培养基。如果D-MEM作为LIPOFECTAMINE2000的稀释液,在5分钟内同稀释的DNA混合。

4.混合稀释的DNA(由第2步)和稀释的LIPOFECTAMINE2000(由第3)。在室温保温20分钟。注意:溶液可能会浑浊,但不影响转染。复合物可以在室温保持6小时稳定。

5.直接将复合物加入到每孔中,摇动培养板,轻轻混匀。注意:如果在无血清条件下转染,使用含血清的正常生长培养基进项细胞铺板。在加入复合物前移去生长培养基,替换为0.5ml无血清培养基。

6.37℃,5%CO2种保温24-48小时。无须取代哦复合物或更换培养基。或者在4-5小时后更换生长培养基也不会降低转染活性。

7.在细胞中加入复合物24-72小时后,分析细胞抽提物或进行原位细胞染色,检测报告基因活性。这依赖于细胞类型和启动子活性。对稳定表达,在开始转染一天后讲细胞传代至新鲜培养基中,2天后加入筛选抗生素。进行稳定表达需要数天或数周。

Solarbio table 6

Cell line

Cills/well(×105

Lipofectamine2000reagentul

CHO-S

1.5

2.5-3.0

COS-7L

0.8

2.5-3.0

293H,293F

2.0

1.5-2.0