Pfu DNA Polymerase

Pfu DNA Polymerase是一种从Pyrococcus furiosus中分离得到的热稳定性酶，分子量大约为90kDa (1)。该酶在75℃时可进行DNA复制，在镁离子存在的条件下可催化核苷酸沿5`→3`方向发生聚合反应，形成双链DNA。 Pfu DNA聚合酶也具有3`→5`外切酶(校正)活性。当聚合反应发生碱基错配时，聚合酶的校正活性可将错配的碱基切除。因而，推荐Pfu DNA聚合酶用于高保真的PCR反应和引物的延伸反应(2-5)。Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平端。

Pfu DNA聚合酶的10×反应缓冲液(含有MgSO4)：200mM Tris-HCl(pH 8.8，25℃), 100mM KCl, 100mM (NH4)2SO4, 20mM MgSO4,1.0% Triton® X-100和1mg/ml无核酸酶的BSA。

特点

  • 高保真：在所有热稳定性聚合酶中Pfu DNA聚合酶的错误几率最低(4,5)。

  • 完备：提供含有20mM MgSO4的10×反应缓冲液。

  • 品质保证: Promega公司的PCR系统，酶和试剂被证明在PCR中能得到可靠高效的结果。

用途

推荐将Pfu DNA聚合酶用于要求高保真的PCR反应，引物的延伸反应以及其它应用（2-5）。 

操作手册 Priomega Product Informatin  9PIM774

储存条件: 储存于–20°C。

储存缓冲液: 50mM Tris-HCl (pH 8.2，25℃), 0.1mM EDTA, 1mM DTT，50% glycerol和0.05% CHAPS。

单位定义:在75℃条件下，30分钟内催化10nmol dNTP的掺入到酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。

参考资料

1. Fiala,G.and Stetter,K.o.(1986) Arch.Microbiol.145,56.

2. Lundberg,K.s.et al.(1991)Gene 108,1-6

3. Flaman,J.M.et al.(1994) Nucl.Acids Res.22,3259-60

4. Cline,J.et al.(1996)Nucl.Acids Res.24,3546-51

5. Andre,P.et al.(1997) Genome Res.7,843-52

技术资料                                                 

DNA Analysis Notebook                          BR129

Amplification Products Brochure            BR139

Promega Notes                                        PN071

Pfu DNA Polymerase Data Sheet           DS246