通用RT-PCR试剂盒(AMV)货号：RP1200规格：50T/100T保存：-20℃保存，避免反复冻融，复检期为1年。产品内容：试剂盒组成50次100次AMV(10U/ul)50ul100ul10×AMV Buffer100ul200ulOligo(dT)16(10uM)100ul200ulDTT(200mM)75ul150ulRNasin(40U/ul)25ul50uldNTPs(10mM)100ul200ulTaq Polymerase(5U/ul)25ul50ul10×PCR Buffer250ul500ulMgCl2(25mM)200ul400ulRNase-free ddH2O1ml2ml说明书1份1份产品简介：本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用AMV进行反转录反应，能够获得更长的反转录产物。同时，在20ul反转录体系和50ul PCR反应体系中，还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT酶采用进口的AMV，所以cDNA更长，基因的信息保留得更完整！反转录过程中特异的RNase抑制剂可有效降低由于外源RNase污染而导致实验失败的风险。本试剂盒使用方便、快捷，可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。操作步骤：一、反转录反应1、在冰浴的无RNase的离心管中加入如下反应成分：2-5ug总RNA或50-500ng mRNA2ul Oligo(dT)16或2 pmole基因特异性引物补RNase-free ddH2O至14.5ul2、65℃保温5min后迅速在冰上冷却2min，简短离心收集反应液后加入以下各组分：2ul 10×AMV Buffer1ul dNTPs0.5ul RNasin1ul AMV1ul DTT3、42℃温浴60min，如果是用随机引物，请先将离心管置25℃温浴10min，再42℃温浴60min。4、95℃加热5min终止反应，置冰上进行后续实验或-20℃保存。二、PCR反应1、按以下各组分配制50ul PCR反应体系：10×PCR Buffer 5ulMgCl2 4uldNTPs 1ul上游引物（用户自备10um） 1ul下游引物（用户自备10um） 1ulRT反应产物 1-2ulTaq Polymerase 0.5ulddH2O x ulTotal Volume 50ul2、混匀后短暂离心，PCR仪扩增，琼脂糖凝胶电泳观察结果。注意事项：1、用于cDNA合成反应的相关试剂和耗材尽可能用DEPC进行处理，并在高压灭菌后使用。有些试剂不能高压灭菌时，首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后，再将溶液进行过滤除菌处理。2、RNA样品要避免反复多次冻融，应使RNA在冰浴中处于融化状态。相关产品：R1600 DEPC处理水SR0060 液相RNase清除剂R1200 总RNA提取试剂盒SR0080 RNAsaver RNA长效保存液R1050 5×RNA Loading BufferRP1100 通用RT-PCR试剂盒(M-MLV)PC2440 RandomPC2450 Oligo T16D1020 10×DNA上样缓冲液T1060 50×TAE 缓冲液Solarbio Beijing Solarbio Science & Technology Co., LtdTel: 010-56371210Fax: 010-56371281/82Http://www.solarbio.cn