


目录号 | 规格 | 价格 | 说明书下载 | E066-01A | 100次 | 600元 |  | E066-01B | A包装×5 | 2430元 | |
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· PCR产物免回收测序纯化试剂盒内容 (250 U)
核酸外切酶I(20U/μl) | 50 μl |
热敏***酸酶(5U/μl) | 100 μl |
10× AP Buffer | 1000 μl |
· PCR产物免回收测序纯化试剂盒说明
对PCR产物的测序通常需要对PCR产物进行胶回收、柱纯化等处理,不仅成本高,费事,而且还必然损失一定量的产物。在PCR产物不易获得的情况下,采用以上方法往往会使实验的费用和时间成倍增加。如果能对PCR产物直接测序将解除这些烦恼。 SinoBio提供的免回收PCR产物测序纯化试剂盒利用核酸外切酶I和热敏碱性***酸酶,仅需简单的保温步骤,方便地去除去除多余的引物和dNTPs,净化的PCR产物可直接用于测序反应,且不会损失任何产物。此法可以避免繁琐的胶回收、柱纯化、沉淀、磁珠、过滤、透析等方法,大大节省实验费用及时间。
· PCR产物免回收测序纯化试剂盒用途
适用于大规模PCR产物净化测序,大幅提高实验效率,节省实验费用及时间。
· PCR产物免回收测序纯化试剂盒特点
PCR反应结束后,由于产物里一般还残留着引物和及dNTPs,这些残留物会阻碍测序反应的进行,如果去除它们,就可以实现对PCR产物的直接测序。热敏碱性***酸酶可以分解残余的dNTP,而核酸外切酶I可高特异性地分解单链DNA,而对双链DNA无作用。用这两种酶对PCR产物进行“净化”后,可彻底降解残留引物及dNTPs,随后的80°C保温过程完全灭活核酸外切酶I和热敏碱性***酸酶,使净化后的产物可直接用于测序反应。
· 质量保证
经测试,经本试剂盒净化的PCR产物可直接用于测序反应。
· PCR产物免回收测序纯化试剂盒建议
1、取出7.5 μl PCR反应混合物;
2、在反应混合物中加入0.5 μl (10 units)的核酸外切酶 I (20,000 units/ml),37°C反应15分钟;
3、再加入1μl的10× AP Buffer 和1μl (5 units)热敏***酸酶,37°C反应15分钟;如果反应时间延长,可减少酶用量,需试验验证。
4、热失活核酸外切酶 I和热敏***酸酶:80°C保温20分钟,终止反应。反应物可直接用于测序。
· 其他说明
详细内容请参考说明书