KAPA 二代测序文库定量试剂盒
英文名称: KAPA NGS
型号:null    产品货号: KAPA
价格:请致电:010-57128832,18610462672
品牌: 美国

KAPA 二代测序文库定量试剂盒
适用平台:
1、Illumina Genome Analyzer
2、Roche 454 GS Titanium and FLX
3、ABI SOLiD
快速、高效定量、可靠的文库定量对于二代测序十分重要
1、过高估计文库的大小,导致数据读取量少,基因组覆盖率低;
2、过低估计文库的大小,导致clusters或多重模板太多,数据质量不高;
 
Real-time PCR 与二代测序文库定量
1、只有qPCR可以定量文库中模板的数量,利于emPCR和桥PCR反应;
2、qPCR灵敏度高,可以精确定量,且所需试验材料量极少。
结论:qPCR是二代测序中文库定量的最佳选择。
 
普通qPCR方法的缺点:
1、普通qPCR含有的是野生型Taq酶,而反应体系中的SYBR Green燃料对其有抑制:
(1)扩增长度大于400bp时,扩增效率降低;
(2)GC或AT含量过高是,扩增效率降低。
2、自制DNA标准品,费时,定量不准,不能保证每个孔的均一性。
 
KAPA二代测序定量试剂盒克服以上缺点:
1、DNA聚合酶是二代酶,对抑制剂不敏感,与DNA结合更好,单位酶扩增效率更高,可以扩增长片段(1kb)和复杂结构的模板;
2、试剂盒中的DNA标准品是专为二代测序平台设计,稳定性高,均一性好。
 
KAPA SYBR FAST qPCR试剂盒优点:
1、反应效率高;
2、可扩增AT/GC含量高的模板;
3、高灵敏度和线性特征;
4、动态范围宽
5、重复性强;
6、速度快,且灵敏度与效率高。
 
 
 
美国几大二代测序中心已经开始使用该试剂盒
1、US Next Generation Sequencing Centres (NGSC)
2、Broad Institute
3、the Joint Genome Centre
4、 the J Craig Venter Institute
5、Beckmann Coulter and UC Berkley
 

="Arial">)氨基甲烷,TRIS在实验室中的应用

Tris常用作生物缓冲液,常配成pH值为6.8,7.4,8.0,8.8。其pH值随温度变化很大。一般来说,温度每升高一度,PH值下降0.03

1M Tris-HCl 6.8和1.5M Tris-HCl 8.8SDS-PAGE最常用的试剂。

而由Tris配成的TAE,TBE等是DNA电泳最常用的试剂,TE(pH8.0)主要用于溶解DNA。(TE为 Tris加EDTA合称。)

Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸蛋白质的溶剂,还有许多重要用途。Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫(C. elegans核纤层蛋白(lamin)的中间纤维的形成。Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。此外,Tris还是制备表面活性剂硫化促进剂和一些药物的中间物。Tris也被用作滴定标准物。

北京索莱宝科技有限公司 提供高品质的生化试剂

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