Shrimp Alkaline Phosphatase

Shrimp Alkaline Phosphatase(SAP，虾碱性***酸酶)催化­DNA和RNA 的 5`***酸的脱***酸反应。与Calf Intestinal Alkaline­Phosphatase不同，当65℃加热15分钟后，SAP会完全不可逆失活。­碱性***酸酶通过消除5`-末端的***酸基团，阻止线性化的克隆载体­DNA的重新环化及再连接；也可以用于DNA或RNA的5`***酸化末端­的脱***酸，以利于[32P]ATP和T4 Polynucleotide Kinase(T4多聚核­苷酸激酶)进行标记。SAP对于5`突出端、5`凹端及平末端都具有活­性(1)。

特点­ 

•  方便：当65℃加热15分钟后，SAP会完全不可逆失活，这使得碱性***酸酶处理后无需纯化即可进行下游操作，如内切酶消化、­脱***酸及连接操作。­ 

•  灵活：在大多数1×反应缓冲液中均保持活性。­ 

•  蓝/白克隆验证： Promega的蓝/白克隆检测为用于克隆的酶提供了高水平的质量控制。­ 

•  提供10×反应缓冲液：0.5M Tris-HCl (pH 9.0)，100mM MgCl2。

操作手册 Promega Product Information 9PIM820

储存条件：储存于-20℃。

储存缓冲液：25mM Tris-HCl (pH 7.6,4℃)，1mM MgCl2，0.1mM­ZnCl2和50% (v/v)甘油。

单位定义：一个单位定义为：在37℃每分钟催化水解 1mmol 4-***­***基***酸所需要的酶量。反应条件为：1M二乙醇胺，10.9mM对硝­基***基***酸，0.5mM MgCl2(pH 9.8)。

质量控制测试：活性，SDS-PAGE/纯度，核酸内切酶，DNase，­RNase，蓝/白克隆检测。

来源：Pandalus borealis。

参考文献­1. Sambrook, J. et al. (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold­Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York.

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