| 重组烟草蚀纹病毒蛋白酶 英文名称： rTEVProtease | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 型号:null 产品货号： 20403ES80 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 价格:请致电：010-57128832,18610462672 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 品牌: yeasen | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
rTEVProtease重组烟草蚀纹病毒蛋白酶 产品信息
产品描述 重组型TEV蛋白酶（rTEV）是经过基因工程改造和纯化后的重组蛋白酶，不仅保持天然TEV酶的功能活性，且在广谱的温度范围内表现出更好的稳定性和特异性。rTEV是一种用来切除融合蛋白上亲和标签的常用工具酶，具有很强的位点特异性，严格识别七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S)，切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸/丝氨酸之间。普遍应用的七氨基酸序列为：Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH 7.0，30°C时可达到最佳活性，但在pH 6.0-8.5和温度4-30°C的广泛范围内皆有活性（见表1），使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而灵活变动。另外rTEV切割后也能利用其N端的 6×His标签，通过Ni-NTA树脂去除，以达到纯化目的蛋白的目的。 表1. 不同温度下rTEV酶切活性
影响天然TEV酶活性的常见因素：1）PMSF和AEBSF（1mM），TLCK（1mM），Bestatin（1 mg/ml）、Pestatin A（1mM），EDTA（1mM）以及E-64（3 mg/ml），以上这些蛋白酶抑制剂对rTEV的活性没有影响；2）Zn离子（＞5 mM）对rTEV活性有抑制；3）与半胱氨酸反应的试剂也是rTEV的潜在抑制剂。 产品性质
产品组分
运输与保存方法 冰袋（wet ice）运输。 收到产品后，请将rTEV Buffer 1、rTEV Buffer 2置于-20 ºC保存，一年稳定。对于rTEV Protease，短期使用，可置于-20 ºC保存，6个月稳定；长期使用，请置于-70℃保存，一年稳定。强烈建议收到货或者第一次使用时将各组分分装保存，特别是rTEV Protease，以及rTEV Buffer 2（1000×），避免反复冻融。 应用实例 1. 在EP管中配制如下反应体系，
【*】：取适量的rTEV Buffer 2（1000×）做10倍稀释到rTEV Buffer 2（100×），再根据以上体系加量。 2. 30℃孵育，在1、2、4、6小时分别吸出30 μl上述反应液，置于单独的EP管中。 3. 向上述EP管中加入30 μl 2×SDS Loading Buffer，置于-20℃。 4. 样品全部反应完毕后，样品煮沸5 min，取40 μl进行SDS-PAGE分析。确定最佳反应时间。如融合蛋白要求低温处理，可将反应液置于4℃，请延长反应时间，并增加rTEV酶用量。 注意事项 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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