RNeasy/miRNeasy Mini Kit
英文名称: RNeasy/miRNeasy Mini Kit
型号:null    产品货号: 217004
价格:请致电:010-57128832,18610462672
品牌: 美国

 

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【详细说明】

RNeasy Mini Kit

从动物细胞或组织,酵母或细菌中,纯化多达100 ug 总RNA

  • 20分钟内即获得高品质的总RNA
  • 无需***酚/氯仿抽提,无需氯化铯梯度离心,无需氯化锂或乙醇沉淀
  • 极佳的RNA得率
  • 即用型RNA用于下游各种应用

 

原理

RNeasy Mini Kit 可从少量起始样本中(最多30 mg 组织或 1 x 107 细胞)有效纯化总 RNA (见图 "RT-PCR of RNA from 100 Cells")。总RNA可方便地从动物细胞及组织、革兰氏阳性或革兰氏阴性细菌*或酵母?(见表"Total RNA Yields Obtained with RNeasy Mini Kits" 和图"High-Quality RNA from a Variety of Samples")中纯化出来。还提供从真核细胞中分离细胞质RNA?,回收未完全纯化的RNA、体外转录和酶促反应得到的RNA。此外,QIAGEN提供其他特殊应用的操作方法,包括真空处理RNeasy mini 分离柱的流程,还可用QIAshredder Homogenizers 方便地将细胞裂解物匀质化。

* 提供溶菌酶 (细菌样品必需)。
?不提供溶壁酶、消解酶、玻璃微珠 (酵母样品必需)。
?需要加入额外的缓冲液。实验方法中提供缓冲液配方。

RNeasy Mini Kit 特性

规格: 带1.5 ml 和2 ml 收集管的Mini离心柱
起始样本量:  10 - 1 x 107 细胞;0.5-30 mg 组织;<5 x 107 酵母细胞
制备时间: 20 分钟
结合能力: 最多 100 μg RNA
产量: 根据样本类型不同而有所不同, 见
洗脱体积: 30-100 μl

RNeasy技术将高效的的异硫*酸胍裂解技术与快速高纯度的硅胶膜纯化技术相结合,使总RNA分离变得简单化。该技术无需通过氯化铯(CsCl)梯度离心或氯化锂/乙醇沉淀。RNeasy样本制备技术已被完全注册,纯化得到的核酸可用于任何分子检测或其他下游应用中,而无侵犯专利的风险。

RNeasy试剂盒提供高品质RNA,几乎无DNA残留。对微量DNA非常敏感的RNA应用,残留的DNA可在RNeasy流程中使用RNase-Free DNase Set方便地通过DNA酶柱上消化去除。

Total RNA yields obtained with the RNeasy Mini Kit?

起始样品    平均产量(μg)
动物细胞
LMH (1 x 106)
HeLa (1 x 106)
COS-7 (1 x 106)
淋巴细胞(未刺激)(1 x 106)
 
12
15
35
0.5
小鼠组织
肝脏(10 mg)
肺 (10 mg)
脾(10 mg)
 
40
10
35
酵母细胞
S. cerevisiae (1 x 107)
 
25

* 提供溶菌酶、消解酶或玻璃珠(处理酵母细胞需要)。
? 由于发育期、种类和生长条件的不同所需的量也不同。由于应用RNeasy 处理可富集 >200 nt的RNA,RNA 产量不包括5S rRNA、tRNAs或其他小分子RNA。

操作流程

首先裂解并匀质化样品。在裂解液中加入乙醇来提供合适的结合条件,接着将裂解液上样到RNeasy硅胶膜上。RNA与硅胶膜结合,有效洗涤去除其他各种污染物。最后将浓缩的纯RNA洗脱到无RNA酶的水中。

应用

经RNeasy技术纯化得到的RNA,A260/A280比值可达1.9-2.1(测于10 mMTris-Cl,pH7.5),非常适合于各种下游应用,包括:

提供一系列经优化的试剂盒,用于从组织样品中纯化RNA。应用产品搜索选择正确的试剂盒。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

miRNeasy Mini Kit

从多种动物组织和细胞中纯化microRNA和总RNA

  • 有效纯化miRNA和总RNA
  • 有效富集miRNA(和其他小RNAs)
  • 高品质RNA适合各种下游应用
  • 灵活的操作方法可用于共纯化或分离单独组分

Images

在大范围起始样本量内高效纯化从各种组织中高效共纯化miRNeasy操作步骤高效富集小RNA高纯度RNA,不含***酚RNeasy Kit 表现优于 TRIzol

原理和过程

miRNeasy Mini Kit 可纯化18nt以上的总RNA,另外也可单独进行miRNA富集和总RNA(>200 nt)纯化,操作步骤参见流程图。 对于及其敏感的下游应用,还需单独进行miRNA富集。

从动物组织和细胞中高效纯化

miRNeasy Kits 可确保从少量起始样本中的组织和细胞中高效纯化。见图"在大范围起始样本内确保高效纯化"所示的结果,随着样本量的减少,CT值线性下降,这说明在大范围起始样本量内,该试剂盒可高效纯化miRNA。

可从各种组织和细胞中提取RNA,包括难以裂解的组织(见图"从各种样本中高效共纯化")。包括miRNA的总RNA纯化可直接与手工操作的miRNA或其他任何研究的miRNA的表达水平作对比。

高效富集miRNA

对于一些敏感的下游应用还需要富集不含大分子RNA的miRNA。miRNeasy Kits确保对小至18 nt的RNA的高效富集。如图"高效富集小RNA"所示,应用miRNeasy Mini Kit纯化后,微小RNA清晰可见,而用其他试剂盒制备的样本则非常模糊。

高纯度RNA

应用miRNeasy Kits制备的RNA纯度很高,可直接用于敏感的下游应用。

miRNeasy操作步骤可消除对下游分析赵成干扰的盐或***酚污染的可能性(见图"高纯度RNA,不含***酚")。除了高纯度,miRNeasy Kits相比TRIzol Reagent 等可获得更高产量的miRNA,诸如应用(见图"miRNeasy Kit表现优于TRIzol")。

在QIAcube上自动纯化miRNA

可在QIAcube上自动纯化含有miRNA的总RNA。独特的QIAcube应用先进的技术处理QIAGEN离心柱,可实现低通量样本自动化制备的无缝整合。应用QIAcube制备样本与手工操作步骤相同(如裂解、连接、冲洗和洗脱), 可确保您连续应用miRNeasy Mini Kit纯化高品质的RNA。更多关于自动化过程的信息,请参见相关操作步骤

应用

miRNeasy Mini Kit 抽提所得的含有miRNA的总RNA可用于下列各种应用:

  • Northern blot分析
  • 定量 real-time RT-PCR (参见miScript System
  • Microarray analysis