2X Rapid Ligation Buffer

The LigaFastTM Rapid DNA Ligation System(LigaFastTM DNA­快速连接系统)可在5分钟内高效地将粘性末端DNA插入片段与质粒­载体连接（平末端插入只需15分钟）。快速连接是基于T4 DNA连接­酶与独特的2X Rapid Ligation Buffer(2X快速连接缓冲液)结合而实­现的。LigaFastTM System可以免除连接DNA转化前的进一步纯化。­独特的2X Rapid Ligation Buffer(2X快速连接缓冲液)无需在使用前­加入ATP或Mg2+。

特点­ 

•  灵活：可用于5`、3`或平末端DNA的插入。­ 

•  快速：在室温下，粘性末端连接需要5分钟，平末端连接需要15分钟。­ 

•  方便：在热休克转化E. coli.前不需要进行被连接DNA的纯化，连接反应可在室温下完成。­ 

•  即用：不需要在使用前对缓冲液进行调整。­ 

•  高效：使用LigaFastTM System连接的效果与标准的过夜连接效果相同。­ 

•  蓝/白克隆验证：Promega的蓝/白克隆检测为用于克隆的酶提供了高水平的质量控制。

操作手册   Promega Product Information   9PIM822

储存条件：储存于-20℃。

储存缓冲液：10mM Tris-HCl (pH 7.4，25℃)，50mM KCl，1mM­DTT，0.1mM EDTA和50%甘油。

单位定义：T4 DNA Ligase的0.01 Weiss单位定义为：在16℃，20分­钟内催化多于95%的1mg λ/ HindIII片段的连接所需要的酶量。

质量控制测试：活性，SDS-PAGE/纯度，DNase，核酸内切酶，­RNase，蓝/白克隆检测。

技术资料 

Promega Notes PN071, PN077

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