Kinase-Glo® Plus Luminescent Kinase Assays

Kinase-Glo® Luminescent Kinase Assays(a,b) (Kinase-Glo® 激酶发光检测试剂盒) 是一种均质的非***性的方法，用于检测激酶反应后溶液中ATP的剩余含量来定量地检测纯化激酶的活性。此试剂盒为多孔板检测模式而设计，是自动化高通量筛选(HTS)的理想选择。该方法可以用于分析蛋白质、脂质和糖激酶。整个操作过程只需在激酶的完全反应中加入单一的溶液即可。溶液加入后会产生与ATP含量相关的发光信号，而该信号的强弱与激酶的活力成反比。Kinase-Glo®试剂盒产生的"辉光型"发光信号是由专利技术的萤光素酶(Ultra-GloTMLuciferase)和独有的缓冲液系统产生的。当在检测时存在激酶反应缓冲液，如PKA的反应缓冲液，其发光信号的半衰期长于5个小时，因此不需用带有进样器的发光检测仪，可以直接进行批量处理。该试剂盒无论在96孔板还是384孔板分析时都有非常好的Z`-值(通常高于0.7)，可以很容易检测到已知的激酶抑制剂，并且产生的IC50值与文献所报道的相当。

Kinase-Glo® 检测系统可根据其对ATP线性反应的不同进行区分。最初的Kinase-Glo® 试剂在10mM范围内和ATP存在线性关系；Kinase-Glo® Plus试剂在100mM 范围内和ATP存在线性关系；最新的Kinase-Glo® Max检测方法在500mM范围内和ATP存在线性关系，非常适用于Km常数高的激酶的ATP检测，也适用于筛选不竞争激酶结合位点的激酶抑制分子。

特点

  •  可分析多种激酶: 应用范围广，适用于各类激酶（包括脂质、糖和醇激酶）和各类底物（肽、蛋白质、脂质、糖和醇类）。

  •  结果可靠: 相比于其它的基于萤光素酶的检测试剂，本试剂盒的发光信号不易受到受试化合物的干扰。该试剂盒无论在96孔板还是384孔板检测时，都有非常好的Z`值(通常高于0.7)。

  •  操作简单: 均质检测，所有反应仅在一个孔中进行。

  •  无***性: 不产生***性废物和安全隐患。

  •  自动化检测：请浏览www.promega.com/automethods/了解关于自动化方法的信息。

  •  可定制或批量订购: 要获取更多关于此产品的定制信息，请浏览:  www.promega.com/myway/

  •  筛选非ATP结合位点抑制物：用500mM 高浓度ATP（Kinase- Glo® Max assay）。

操作手册 

Kinase-Glo® Luminescent Kinase Assays Technical Bulletin      TB372   

发光值和ATP量线性相关。Kinase-Glo® 激酶发光检测试剂盒检测得到的发光值和反应中ATP的量成直接的线性相关。A，Kinase-Glo® Plus检测。B，Kinase-Glo® Max检测。Kinase-Glo® 检测法线性范围在10mM（数据没有显示）。

储存条件: 储存于-20℃。避免反复冻融或者频繁的温度变化。温度的波动将会严重影响产品的稳定性。

技术资料 

Cell Notes                      CN005, CN011, CN012

Promega Notes            PN083, PN092, PN093

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