Pfu DNA聚合酶（高保真酶）

编号 规格 售价￥ ZP00201 100U 50 ZP00202 500U 225 ZP00203 1000U 400

相关试剂 抽提试剂盒... Taq酶... dNTPs... 荧光定量试剂盒... 枪头、离心管...

Pfu酶用途

主要用于对 PCR 保真性要求较高的实验，如基因筛选、克隆表达、突变检测、定点突变等等。

Pfu酶特征

•  克隆有 Pyrococcus Furiosis DNA Polymerase 基因的大肠杆菌经诱导表达后，再经三次过柱纯化分离出来的一个约 90 KD 的重组蛋白。

•  具有 5 到 3 ‘合成 DNA 的能力；有 3 到 5 ‘外切酶的活性即纠错能力，通俗地说，出错的机率是普通 Taq 酶的十分之一。为了减少由 3′-5′ 外切酶活性引起的引物降解，闪晶公司强烈推荐在冰浴上添加所有的试剂并且在温度达到 60 -65°C 时再加入 Pfu DNA 聚合酶以便进行热启动或者在冰浴上添加试剂后放在预热到 95°C 的 PCR 仪上。

•  无 5 到 3 ‘外切酶的活性， 不能用于实时荧光PCR 。

•  无 3 ‘端加 A 的功能，产物为平端，如果需要做 T － A 克隆，需要做添 A 实验。

•  无外源核酸酶和细菌 DNA 污染。

•  SDS － PAGE 检测，纯度＞ 95 。

•  最佳延伸温度 72 ℃ ，最佳 Mg 2+ 浓度 2.0mM ，最佳 dNTPS 浓度 0.2mM ，延伸速度为 600base/min ； Pfu DNA 聚合酶比 Taq DNA 聚合酶的延伸反应速率低，因此闪晶公司推荐延伸反应时间为每 kb 需 2 分钟。

•  10 × PCR buffer: 500mM KCl, 100mM Tris-HCl (pH 9.0 ， 25℃ ), 1 TritonX-100 和 20mM MgSO4 。

•  Storage buffer: 20mM Tris-HCl (pH 8.0), 100mM KCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 50 甘 油， 0.5 Nonidet -P40 和 0.5 Tween20 。

Pfu酶单位定义

在 74℃ 条件下， 30 分钟内催化 10nmol dNTP 的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。反应条件为： 50mM Tris-HCl (pH 9.0 ， 25℃ ), 50mM NaCl, 5mM MgCl2, 200mM dNTP( 含未标记和标记 [3H] dTTP ), 10mg 活化的小牛胸腺 DNA 和 0.1mg/ml BSA, 终反应体积为 50ml 。

Pfu酶说明书下载　（大宗用户价格面议，电话：021－54460832   ）

 

Gensynthese

Gene Synthesis DNA Synthese

Peptide Synthesis

全基因合成 基因合成 密码子优化   多肽合成

细胞培养 细胞转染 细胞稳转 细胞瞬转

免疫印迹 western blot 蛋白质印迹 病毒构建包装

 载体构建   蛋白表达    蛋白表达纯化

Make Antibody
Lab Consumables
Gene Synthesis
dNTP

 

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PCR，RT-PCR相关酶

Taq DNA聚合酶	M-MLV Transcriptase( 反转录酶 )
Pfu DNA聚合酶	AMV Transcriptase(反转录酶)
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TthDNA聚合酶	UNG酶(尿嘧***DNA糖基化酶)
dNTP	常用的生化酶稳定剂价格表
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